Tuina-intervensjon i natriummonoiodoacetat injeksjon-indusert rottemodell av knet artrose

Summary

Denne protokollen beskriver metodene for Tuina-intervensjon i natriummonoiodoacetat injeksjonsindusert rottemodell av knet artrose (KOA), som gir en referanse for anvendelse av Tuina i KOA dyremodeller. Denne protokollen studerer også den effektive mekanismen til Tuina for KOA, og resultatene vil bidra til å fremme anvendelsen.

Abstract

Knet artrose (KOA), en vanlig degenerativ leddsykdom, er preget av kronisk smerte og funksjonshemming, som kan utvikle seg til uopprettelig strukturell skade på leddet. Undersøkelser av sammenhengen mellom leddbrusk, muskler, synovium og annet vev rundt kneleddet i KOA er av stor betydning. For tiden inkluderer administrerende KOA livsstilsendringer, trening, medisinering og kirurgiske inngrep; Imidlertid mangler fortsatt belysningen av de intrikate mekanismene som ligger til grunn for KOA-relatert smerte. Følgelig forblir KOA-smerte en viktig klinisk utfordring og en terapeutisk prioritet. Tuina har vist seg å ha en regulatorisk effekt på motoriske, immun- og endokrine systemer, noe som fører til utforskning av om Tuina kan lindre KOA-symptomer, forårsaket av oppregulering av inflammatoriske faktorer, og videre hvis de inflammatoriske faktorene i skjelettmuskulaturen kan øke utviklingen av KOA.

Vi randomiserte 32 mannlige Sprague Dawley (SD) rotter (180-220 g) i fire grupper på åtte dyr hver: antiPD-L1 + Tuina (gruppe A), modell (gruppe B), Tuina (gruppe C) og sham kirurgi (gruppe D). For gruppe A, B og C injiserte vi 25 μL natriummonoiodoacetat (MIA) oppløsning (4 mg MIA fortynnet i 25 μL steril saltoppløsning) i høyre kneleddhule, og for gruppe D ble det injisert samme mengde sterilt fysiologisk saltvann. Alle gruppene ble evaluert ved hjelp av de minst til mest stressende testene (potemekanisk tilbaketrekningsterskel, poteuttak, termisk latens, hevelse i høyre kneledd, Lequesne MG score, hudtemperatur) før injeksjon og 2, 9 og 16 dager etter injeksjon.

Introduction

Knet artrose (KOA) er en vanlig degenerativ slitasjegikt, preget av kroniske smerter og funksjonshemming, og relativt alvorlig KOA vil føre til irreversibel strukturell skade på leddet¹. Den høye globale forekomsten av KOA har blitt en stor global folkehelseutfordring ^2,3, noe som alvorlig svekker livskvaliteten til pasienter ^4,5. Studier har vist at KOA påvirker mer enn 260 millioner mennesker over hele verden⁶. Med aldring av befolkningen er den totale prevalensen av KOA i Kina så høy som 17,0% over 40 år, noe som legger en tung byrde på familiene til de berørte ^7,8.

Ifølge kinesisk medisin tilhører KOA kategorien “lammelse”⁹, og Den gule keiserens klassiker i indremedisin forbinder sener, bein og kjøtt med lammelse. Derfor må vi være oppmerksom på sammenhengen mellom brusk, muskel, synovium, samt andre vev rundt kneleddet i KOA. I moderne medisin driver både muskel- og beinbetennelse, som er hovedkomponenter i immunhomeostasen av leddgikt, utviklingen av KOA-smerte. De fleste studier fokuserer imidlertid på bruskbetennelse og synovialbetennelse i beinledd, og det er mangel på artikler som undersøker betennelsesfenomener i skjelettmuskulatur. Derfor er det behov for mer forskning på skjelettmuskulaturens rolle i betennelse for å få en mer omfattende forståelse av KOA og gi ideer til mer effektive behandlingsmodaliteter. I en litteraturgjennomgang fant vi at hemming av immunrelatert faktor programmert dødsligand 1 (PD-L1) forverret progresjonen av KOA^10,11 og at det var differensialuttrykk av IL-15 og FOXO1 i skjelettmuskulaturen hos pasienter med KOA ¹², samt signifikant skjelettmuskulaturbetennelse hos pasienter med KOA i sluttstadiet^, som også var forbundet med endringer i gangart. Det er vist at skjelettmuskulaturen også kan skille ut faktorer som er nært beslektet med inflammatorisk immunitet som IL-6, og at TNF-α også er nært beslektet med PD-L1-banen og KOA^13,14,15.

For tiden inkluderer tilgjengelige behandlinger for KOA vektkontroll, trening, medisinering og kirurgi, som vanligvis inkluderer intraartikulære injeksjoner, smertestillende medisiner, artroskopisk kirurgi og periprostetisk osteotomi i kneet¹⁶. For tiden kan KOA sykdomsprogresjon ikke stoppes helt eller reverseres, og uten en klar forståelse av de komplekse mekanismene som ligger til grunn for KOA-smerte, er KOA-pasienter i fare for overforbruk av smertestillende medisiner og høy forekomst av bivirkninger⁸. De fleste behandlingsstrategier er effektive bare i korte perioder og fokuserer bare på midlertidig lindring av symptomer i stedet for på patogenesen av sykdommen. Derfor er KOA-smerte fortsatt en prioritet og en utfordring for behandling, og utgjør en alvorlig klinisk utfordring. Imidlertid kan Tuina direkte stimulere skjelettmuskulaturen rundt det berørte leddet i KOA-behandling og kan gi noen fordeler. Kombinert med den forrige beskrivelsen er det den ideelle terapien for å studere rollen til skjelettmuskulaturvev i KOA, og avklaring av skjelettmuskulaturvevets rolle i betennelse kan også gi bedre teoretisk støtte til Tuina av KOA.

Studier har vist at massasjeterapi, osteopatisk manipulativ terapi og spinal manipulasjon kan bidra til å lindre smerte og gjenopprette kroppsfunksjon^17,18. Disse manipulasjonene kan virke på lokal betennelse og lindre spasmer og smertestillende gjennom ekstern mekanisk virkning. De kan lindre smerte etter total kne artroplastikk, redusere bruken av smertestillende legemidler, fremme postoperativ utvinning og forbedre biomekanisk balanse¹⁹. Svensk massasje er mulig i behandlingen av slitasjegikt og kan redusere stress og forbedre livskvaliteten²⁰. Den terapeutiske effekten av Tuina på KOA har blitt foretatt av visse studier.

I dette eksperimentet vil teamet vårt undersøke om uttrykket av PD-L1 og relaterte inflammatoriske faktorer i skjelettmuskulaturen kan indusere KOA og fremme utviklingen basert på MIA-indusert KOA-modell hos rotter. Tuina vil også bli implementert for å se om det kan lindre KOA-symptomer forårsaket av økt inflammatorisk faktoruttrykk. Tuina vil bli kombinert med PD-L1-hemming for å demonstrere sammenhengen mellom Tuina-mediert PD-1-vei i skjelettmuskulaturbetennelse som påvirker KOA-utvikling og smerte, og legge grunnlaget for videre flernivåstudier på de terapeutiske mekanismene til Tuina-intervensjon i KOA.

Oppsummert beskriver dette papiret undersøkelsen og utarbeidelsen av mekanismene for skjelettmuskulaturbetennelse i utviklingen av KOA og dens smerte, samt de terapeutiske effektene av Tuina på KOA, fra perspektivet til immuninflammatorisk faktoruttrykk, kombinert med atferdsrelaterte indikatorer, for å gi moderne forskningsbevis for “ubalanse av sene og bein” teori i tradisjonell kinesisk medisin.

Protocol

Alle eksperimenter ble godkjent og overvåket av Animal Care and Use Committee ved Shanghai University of Traditional Chinese Medicine (godkjenningsnummer: SYXK2018-0040), som er i samsvar med bestemmelsene i World Medical Association Helsinki Declaration. 1. Dyr forberedelse Hus 32 Sprague Dawley (SD) hannrotter i alderen 8 uker og veier 180-220 g i et spesifikt patogenfritt husapparat under 12 timer lys / 12 timer mørke sykluser ved 24 ± 2 ° C og 60% fuktighet m…

Representative Results

Den beskrevne protokollen ble implementert i en klinisk setting ved Yueyang Hospital of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine. Figur 1 viser den nøyaktige plasseringen av akupunktene som presses inn hos rotter, og tabell 1 illustrerer de vanlige fordelene ved å stimulere disse punktene. Tabell 2 og tabell 3 gir overbevisende bevis på bemerkelsesverdig smertelindring oppnådd gjennom Tuina-terapi, selv i fravær av PD-1-baneh…

Discussion

Denne studien tar sikte på å vurdere forbedringen av KOA etter Tuina-intervensjon ved å bruke standardiserte atferdsindikatorer og undersøke mekanismene til Tuina for KOA og sammenhengen mellom skjelettmuskulatur og KOA. I motsetning til farmakologiske og kirurgiske terapier har Tuina en positiv regulerende effekt på motoriske, immun- og endokrine systemer. Tuina kan lindre betennelse og smerte forårsaket av sykdom ved å handle på forskjellige mål. For eksempel, ved å regulere TLR4-banen og miRNA, kan den hemme…

Materials

Anti-PD-L1	Abcam, Cambridge, MA, USA	ab80276
electric von Frey esthesiometer	IITC/Life Science, Woodland Hills, CA, USA	ALMEMO 2450
GraphPad Prism 9.0	GraphPad Software		Software for stastistical analysis
monosodium iodoacetate	Sigma-Aldrich Inc	I9148	Resolved into normal saline for injection
pentasorbital sodium	Sigma-Aldrich Inc	P3761
Sprague Dawley (SD) male rats	Shanghai Jihui Experimental Animal Breeding Co., Ltd	No. SCXK (Hu) 2017-0012
thermal analgesia tester	IITC/Life Science	Model 390