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Articolo metodologico

Imitazione del metodo di rotolamento di Ding sulla lesione muscolare indotta da Notexin nei ratti

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DOI:

10.3791/65820

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25 agosto 2023

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In questo articolo

Sommario

Questo protocollo descrive un semplice dispositivo che imita il metodo del rullo di Ding, stabilisce un modello di ratto di lesione muscolare scheletrica e utilizza la colorazione ematossilina-eosina per osservare la patologia del tessuto danneggiato e il test di immunoassorbimento enzimatico per rilevare i cambiamenti nei marcatori di danno sierico.

Abstract

Il metodo del rotolo di Ding è una delle manipolazioni più comunemente usate nelle cliniche di massaggio tradizionale cinese (Tuina) e una delle manipolazioni Tuina contemporanee più influenti in Cina. Si basa sul tradizionale metodo di rotolamento comunemente usato nel genere Zen con un dito e chiamato metodo di rotolamento di Ding. Grazie ai suoi effetti antinfiammatori e di promozione della circolazione sanguigna, il metodo di rotolamento di Ding ha effetti terapeutici sulla miopatia. A causa dell'ampia area di forza applicata alla pelle umana, il metodo di rotolamento di Ding è difficile da eseguire su animali da esperimento con piccole aree cutanee, come ratti e conigli. Inoltre, la forza del Tuina applicata al corpo umano differisce da quella applicata agli animali da esperimento, quindi può accadere che la forza sia troppo alta o troppo bassa per ottenere l'effetto terapeutico del Tuina durante l'esperimento. Questo esperimento mira a creare un semplice massaggiatore adatto ai ratti basato sui parametri di manipolazione del rotolamento di Ding (forza, frequenza, durata del Tuina). Il dispositivo può standardizzare la manipolazione negli esperimenti sugli animali e ridurre la variazione della forza Tuina applicata a diversi animali a causa di fattori soggettivi. È stato stabilito un modello di ratto di lesione muscolare scheletrica indotta da notexina e sono stati utilizzati marcatori di lesione plasmatica creatinchinasi (CK) e proteina legante gli acidi grassi 3 (FABP3) per valutare l'effetto terapeutico di Tuina sulla lesione muscolare scheletrica. I risultati hanno mostrato che questo massaggiatore Tuina potrebbe ridurre i livelli di espressione di CK e FABP3 e rallentare il grado di lesione del muscolo scheletrico. Pertanto, il massaggiatore Tuina qui descritto, imitando il metodo del rullo di Ding, contribuisce a standardizzare la manipolazione Tuina nella ricerca sperimentale ed è di grande aiuto per le successive ricerche sul meccanismo molecolare del Tuina per la miopatia.

Introduzione

Le lesioni muscolari sono lesioni traumatiche comuni nella vita clinica e quotidiana, causate da colpi esterni (contusioni) o sovraccarico cronico delle fibre muscolari (stiramenti), ecc., con conseguente disfunzione muscolare e dolore, compromettendo anche seriamente la qualità di vita del paziente1. Iniziare la riabilitazione il prima possibile dopo una lesione da sforzo acuto è la chiave per ridurre il tempo di ritorno allo sport2 e per ridurre il dolore 3,4. Nella moderna medicina occidentale, il primo soccorso clinico per le lesioni muscolari segue i princip....

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Protocollo

Le procedure che coinvolgono gli animali sono state approvate dal Comitato Istituzionale per la Cura e l'Uso presso l'Università di Medicina Cinese di Hunan.

1. Montaggio del massaggiatore rotante

  1. Selezionare un massaggiatore composto da un rullo di gomma, un supporto per forcella, una molla, un deflettore di limite, una stecca di regolazione, una vite e un'impugnatura in acrilico (Figura 1). Assicurarsi che il rullo di gomma misuri 3 cm di lunghezza e 1,6 cm di diametro, la molla misuri 3 cm di lunghezza e 0,9 cm di diametro, il deflettore di limite sia lungo 3 cm e largo 2 cm e l'im....

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Risultati

Al fine di osservare le proprietà morfologiche del muscolo scheletrico di ratto dopo la lesione, il muscolo gastrocnemio è stato colorato con ematossilina ed eosina e le immagini colorate sono state lette con un software di analisi come descritto nel protocollo per 8 ratti per gruppo. Nei ratti con lesione del muscolo gastrocnemio indotta da notexina (gruppo NTX), molte cellule muscolari erano rotte, atrofiche, necrotiche e disposte in modo irregolare. C'era anche un'elevata infiltrazione di neutrofili e linfociti intorn.......

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Discussione

Qui, abbiamo descritto un protocollo per il trattamento Tuina della lesione muscolare scheletrica nei ratti e poi abbiamo analizzato il grado di lesione muscolare scheletrica dopo il trattamento per verificare l'efficacia del metodo. In particolare, i modelli di danno muscolare scheletrico di ratto, inclusi, a titolo esemplificativo ma non esaustivo, l'induzione di farmaci (notexina, bupivacaina)16, contusione contusiva 26, schiacciamento27 e ischemia-riperfusione

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

Ringraziamenti

Questa ricerca è stata supportata da sovvenzioni della National Natural Science Foundation of China (Grant Nos.82174521), progetto di innovazione per studenti laureati dell'Università di medicina cinese di Hunan (2022CX109)

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Siringa da 1 mLJIANGXI FENGLIN20220521
1,5 microprovette ServicebioEP-150X-J
Provetta da centrifuga da 15 mLServicebioEP-1501-J
Ago 30GCONPUVON220318
Provetta per prelievo di sangue da 5 mLServicebioQX0023
Manico in acrilicoGuangdong Guangxingwang Plastic Materials Co., Ltd65643645
Stecca di regolazioneCREROMEM
Batuffolo di cotoneINOHV22080215
Strumento marcato con enzimiRaytoRT-6100 
EtanoloINOHV211106
Supporto forcellaYongkang Kangzhe Health Technology Co., LtdJL001
Crema di depilazioneVeet, FranciaLOTC190922002
Set di soluzioni di tintura ematossilinaWuhan Google BiotechG1005
Sistema di imaging...Nikon, GiapponeNikon DS-U3
IODOPHOR soluzione di disfectingHale & Hearty20221205
Microscopio otticoNikon, GiapponeNikon Eclipse E100
Deflettore limiteCREROMEM20220724
NotexinLatoxan S.A.S.L8104-100UG
Pentobarbital sodicoMerck KGaAP3761
Kit ELISA per creatina chinasi di ratto (CK)LunChangShuoBiotechYD-35237
Proteina legante l'acido grasso di ratto 3 (FABP3) Kit ELISALunChangShuoBiotechYD-35730
Rullo di gommaHebei Mgkui Chemical Technology Co., Ltd202207
viteWeiyan HardwareB05Z122
Sprague Dawley rattiHunan Slake Kingda Laboratory Animal Co.SYXK2019-0009
MollaBingzhang HardwareTH001
Lama chirurgicaCovetrus#23
Regolatore di pesaturaIyoysHY-XSQ
20220729

Riferimenti

  1. Lempainen, L., et al. Management of anterior thigh injuries in soccer players: practical guide. BMC Sports Science, Medicine and Rehabilitation. 14 (1), 41(2022).
  2. Bayer, M. L., Mackey, A., Magnusson, S. P., Krogsgaard, M. R., Kjær, M. Trea....

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Ristampe e permessi

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