चूहों में नोटक्सिन-प्रेरित मांसपेशियों की चोट पर डिंग के रोल विधि की नकल करना
Summary
यह प्रोटोकॉल एक साधारण उपकरण का वर्णन करता है जो डिंग की रोल विधि की नकल करता है, कंकाल की मांसपेशियों की चोट का एक चूहा मॉडल स्थापित करता है, और सीरम क्षति मार्करों में परिवर्तन का पता लगाने के लिए क्षतिग्रस्त ऊतक और एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख के विकृति का निरीक्षण करने के लिए हेमटोक्सिलिन-ईोसिन धुंधला का उपयोग करता है।
Abstract
डिंग की रोल विधि पारंपरिक चीनी मालिश (तुइना) क्लीनिकों में सबसे अधिक इस्तेमाल की जाने वाली जोड़तोड़ में से एक है और चीन में सबसे प्रभावशाली समकालीन ट्यूना जोड़तोड़ में से एक है। यह पारंपरिक रोलिंग विधि पर आधारित है जो आमतौर पर वन फिंगर ज़ेन शैली में उपयोग की जाती है और इसे डिंग की रोल विधि नाम दिया जाता है। इसके विरोधी भड़काऊ और रक्त परिसंचरण को बढ़ावा देने वाले प्रभावों के कारण, डिंग की रोलिंग विधि का मायोपैथी पर ध्वनि चिकित्सीय प्रभाव पड़ता है। मानव त्वचा पर लागू बल के बड़े क्षेत्र के कारण, डिंग की रोल विधि चूहों और खरगोशों जैसे छोटे त्वचा क्षेत्रों के साथ प्रयोगात्मक जानवरों पर प्रदर्शन करने के लिए चुनौतीपूर्ण है। इसके अतिरिक्त, मानव शरीर पर लागू टुइना की ताकत प्रयोगात्मक जानवरों पर लागू होने से भिन्न होती है, इसलिए ऐसा हो सकता है कि प्रयोग के दौरान ट्यूना के चिकित्सीय प्रभाव को प्राप्त करने के लिए ताकत बहुत अधिक या बहुत कम हो। इस प्रयोग का उद्देश्य डिंग के रोलिंग हेरफेर मापदंडों (ताकत, आवृत्ति, ट्यूना अवधि) के आधार पर चूहों के लिए उपयुक्त एक सरल मालिश बनाना है। डिवाइस पशु प्रयोगों में हेरफेर को मानकीकृत कर सकता है और व्यक्तिपरक कारकों के कारण विभिन्न जानवरों पर लागू ट्यूना बल में भिन्नता को कम कर सकता है। नोटेक्सिन-प्रेरित कंकाल की मांसपेशियों की चोट का एक चूहा मॉडल स्थापित किया गया था, और प्लाज्मा चोट मार्कर क्रिएटिन किनेज (सीके) और फैटी एसिड बाइंडिंग प्रोटीन 3 (एफएबीपी 3) का उपयोग कंकाल की मांसपेशियों की चोट पर ट्यूना के चिकित्सीय प्रभाव का आकलन करने के लिए किया गया था। परिणामों से पता चला कि यह ट्यूना मसाजर सीके और एफएबीपी 3 अभिव्यक्ति के स्तर को कम कर सकता है और कंकाल की मांसपेशियों की चोट की डिग्री को धीमा कर सकता है। इसलिए, यहां वर्णित टुइना मसाजर, डिंग की रोल विधि की नकल करते हुए, प्रयोगात्मक अनुसंधान में ट्यूना हेरफेर को मानकीकृत करने में योगदान देता है और मायोपैथी के लिए ट्यूना के आणविक तंत्र पर बाद के शोध के लिए बहुत मदद करता है।
Introduction
मांसपेशियों की चोटें नैदानिक और दैनिक जीवन में आम दर्दनाक चोटें हैं, जो बाहरी वार (विरोधाभास) या मांसपेशियों के तंतुओं (उपभेदों) आदि के पुराने ओवरस्ट्रेन के कारण होती हैं, जिसके परिणामस्वरूप मांसपेशियों की शिथिलता और दर्द होता है, यहां तक कि रोगी के जीवन की गुणवत्ता को भी गंभीरता से प्रभावित करता है1. एक तीव्र तनाव की चोट के बाद जितनी जल्दी हो सके पुनर्वास शुरू करना खेल2 पर लौटने के समय को कम करने औरदर्द 3,4 को कम करने की कुंजी है। आधुनिक पश्चिमी चिकित्सा में, मांसपेशियों की चोटों के लिए नैदानिक प्राथमिक चिकित्सा दर्द से राहत देने के लिए मांसपेशियों के ऊतकों5 और गैर-स्टेरायडल विरोधी भड़काऊ दवाओं में हानिकारक रक्तस्राव को रोकने के लिए आराम, बर्फ, संपीड़न और ऊंचाई (आरआईसीई) के सिद्धांतों का पालन करतीहै। एक्सोसोम7 और ऊतक इंजीनियरिंग8 जैसे उपन्यास उपचारों की खोज कंकाल की मांसपेशियों की बीमारियों के लिए संभावित उपचार रणनीति बन गई, जो पिछले औषधीय उपचारों की कमियों की भरपाई करती है। हालांकि, यह रोगियों के लिए उपचार की लागत भी बढ़ा सकता है, जिससे उन्हें जबरदस्त वित्तीय दबावमें डाल दिया जा सकता है। इसलिए, मस्कुलोस्केलेटल समस्याओं10 के इलाज के लिए वैकल्पिक और पूरक चिकित्सा की सिफारिश कर रहे हैं. ट्यूना व्यापक रूप से चीन में एक पारंपरिक चिकित्सा पद्धति के रूप में चिकित्सकीय रूप से उपयोग किया जाता है और इसकी प्रभावकारिता और कम दुष्प्रभावों के लिए रोगियों के बीच लोकप्रिय है। मस्कुलोस्केलेटल विकारों के लिए ट्यूना थेरेपी दर्द को कम कर सकती है और समारोह11,12,13में सुधार कर सकती है। श्री डिंग जिफेंग, एक प्रसिद्ध शंघाई तुइना अभ्यासी, ने डिंग की रोल विधि14 की स्थापना की। यह एक बड़ी बल क्षेत्र, समान और कोमल बल और तीव्र पैठ के साथ एक अनूठी रोलिंग और क्रशिंग तकनीक है।
विभिन्न पशु मॉडल विभिन्न एटियलजि पर आधारित होते हैं। उनके फायदे और नुकसान हैं, और सही और उपयुक्त पशु मॉडल का चयन बुनियादी प्रयोगों के लिए बहुत महत्वपूर्ण है, जो कंकाल की मांसपेशियों की चोटों के उपचार के लिए नए उपचार विकसित करने के लिए पुनर्जनन और मरम्मत के सेलुलर और आणविक सिग्नलिंग मार्गों को समझने में मदद करता है। मांसपेशियों की चोट के रासायनिक प्रेरित मॉडल व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है, कंकाल की मांसपेशी के इंजेक्शन के साथ मायोफाइबर परिगलन का कारण बनता है और पुनर्जीवित क्षेत्रों का उत्पादन करता है जो 2 सप्ताह15 के भीतर प्रभावी ढंग से पुन: उत्पन्न कर सकते हैं। नॉटेक्सिन और बुपीवाकेन दोनों मांसपेशियों को नुकसान पहुंचा सकते हैं। हालांकि, नोटेक्सिन बुपीवाकेन की तुलना में कंकाल की मांसपेशियों को अधिक गंभीर मायोटॉक्सिक क्षति का कारण बन सकता है, और प्राकृतिक कार्यात्मक वसूली अपेक्षाकृत धीमीहै16. ड्रग इंट्रामस्क्युलर इंजेक्शन मोल्डिंग में न केवल कम समय लगता है, बल्कि कंकाल की मांसपेशियों की क्षति के नियंत्रित प्रभाव और सीमा भी होती है। यह मात्रात्मक नियंत्रण सफल मोल्डिंग को कम कठिन15,17 बनाता है।
भड़काऊ प्रतिक्रिया एक आवश्यक जैविक प्रतिक्रिया है जिसका मायोपैथी18,19के संदर्भ में बड़े पैमाने पर अध्ययन किया गया है। कंकाल की मांसपेशियों की चोट के शुरुआती चरणों में, myofiber परिगलन स्थानीय मांसपेशी homeostasis बाधित, और कई भड़काऊ कोशिकाओं चोट साइट घुसपैठ, कई समर्थक भड़काऊ साइटोकिन्स19 स्रावित करते हैं. क्रिएटिन किनेज (सीके) कंकाल की मांसपेशियों की चोट का आकलन करने के लिए एक पारंपरिक सीरम बायोमार्कर है। हालांकि, इसमें ऊतक विशिष्टता20 और संवेदनशीलता21 का अभाव है, जो दवा-प्रेरित मांसपेशियों की क्षति की सीमा का आकलन करने की अपनी क्षमता को सीमित करता है और अप्रत्यक्ष रूप से चोट के बाद मांसपेशियों की वसूली की सीमा की रिपोर्ट करता है। फैटी एसिड बाइंडिंग प्रोटीन 3 (एफएबीपी 3) सहित उपन्यास बायोमार्कर ने हाल ही में कंकाल की मांसपेशियों की चोट के कृंतक मॉडल में अपेक्षाकृत उच्च ऊतक विशिष्टता और संवेदनशीलता दिखाई है। FABP3 बाध्यकारी प्रोटीन का एक परिवार है जो मुख्य रूप से हृदय और कंकाल की मांसपेशी कोशिकाओं में व्यक्त किया जाता है और फैटी एसिड चयापचय, परिवहन और सिग्नलिंग22 में फंसा होता है। इसलिए, हमने उपचार के बाद नॉटेक्सिन-प्रेरित कंकाल की मांसपेशियों की क्षति और वसूली की सीमा का आकलन करने के लिए दो बायोमार्कर, सीके और एफएबीपी 3 का संयोजन चुना।
कृन्तकों में, मांसपेशियां उथली होती हैं, और त्वचा का क्षेत्र छोटा होता है, जो यह भी निर्धारित करता है कि कृन्तकों में मालिश के विभिन्न पैरामीटर मनुष्यों के समान नहीं होंगे, जैसे कि पशु चिकित्सा में, मालिश चिकित्सक को डिंग के रोल विधि का उपयोग करके कम बल के साथ उनका इलाज करना चाहिए, और घायल क्षेत्र के छोटे आकार के कारण इस तकनीक के संचालन के लिए अनुकूल नहीं हो सकता है, जो अंततः मालिश की प्रभावशीलता में कमी का कारण बन सकता है। इसलिए, प्रयोग ने घर में बने रोलिंग मालिश का उपयोग किया, जो डिंग की रोल विधि की विशेषताओं के अनुरूप है, चूहों में नॉटेक्सिन-प्रेरित कंकाल की मांसपेशियों की चोट मॉडल के चिकित्सीय प्रभाव में हस्तक्षेप करने और मूल्यांकन करने के लिए, जो मानकीकृत करने में मदद करता है तुइना की कार्रवाई के आणविक तंत्र की गहराई से जांच करने के लिए प्रयोगात्मक पशु अध्ययन में तुइना के पैरामीटर, मस्कुलोस्केलेटल रोगों पर एक पारंपरिक चीनी चिकित्सा उपचार विधि।
Protocol
Representative Results
Discussion
यहां, हमने चूहों में कंकाल की मांसपेशियों की चोट के ट्यूना उपचार के लिए एक प्रोटोकॉल का वर्णन किया और फिर विधि की प्रभावशीलता को सत्यापित करने के लिए उपचार के बाद कंकाल की मांसपेशियों की चोट की डिग्री क…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस शोध को चीन के राष्ट्रीय प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (अनुदान संख्या 82174521), हुनान यूनिवर्सिटी ऑफ चाइनीज मेडिसिन (2022CX109) के स्नातक छात्रों के लिए इनोवेशन प्रोजेक्ट के अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था
Materials
| 1 mL syringe | JIANGXI FENGLIN | 20220521 | |
| 1.5 microtubes | Servicebio | EP-150X-J | |
| 15 mL centrifuge tube | Servicebio | EP-1501-J | |
| 30G needle | CONPUVON | 220318 | |
| 5 mL blood collection tube | Servicebio | QX0023 | |
| Acrylic handle | Guangdong Guangxingwang Plastic Materials Co., Ltd | 65643645 | |
| Adjustment splint | CREROMEM | 20220729 | |
| Cotton Swab | INOHV | 22080215 | |
| Enzyme-labeled Instrument | Rayto | RT-6100 | |
| Ethanol | INOHV | 211106 | |
| Fork holder | Yongkang Kangzhe Health Technology Co., Ltd | JL001 | |
| Hair removal cream | Veet, France | LOTC190922002 | |
| Hematoxylin dyeing solution set | Wuhan Google Biotech | G1005 | |
| Imaging system | Nikon, Japan | Nikon DS-U3 | |
| IODOPHOR disfecting solution | Hale&Hearty | 20221205 | |
| Light microscope | Nikon, Japan | Nikon Eclipse E100 | |
| Limit baffle | CREROMEM | 20220724 | |
| Notexin | Latoxan S.A.S. | L8104-100UG | |
| Pentobarbital sodium | Merck KGaA | P3761 | |
| Rat creatine kinase (CK) ELISA kit | LunChangShuoBiotech | YD-35237 | |
| Rat fatty acid-binding protein 3 (FABP3) ELISA kit | LunChangShuoBiotech | YD-35730 | |
| Rubber roller | Hebei Mgkui Chemical Technology Co.,Ltd | 202207 | |
| Screw | Weiyan Hardware | B05Z122 | |
| Sprague Dawley rats | Hunan Slake Kingda Laboratory Animal Co. | SYXK2019-0009 | |
| Spring | Bingzhang Hardware | TH001 | |
| Surgical blade | Covetrus | #23 | |
| Weigh controller | Iyoys | HY-XSQ |
Riferimenti
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