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Articolo metodologico

Un semplice metodo di flottazione fecale per la diagnosi di nematodi zoonotici in condizioni di campo e di laboratorio

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DOI:

10.3791/66110

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15 dicembre 2023

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In questo articolo

Sommario

Questo lavoro descrive l'uso di un metodo di galleggiamento per identificare Toxocara canis e Ancylostoma spp. rilevati in campioni fecali raccolti da cani in Messico dal 2017 al 2021 in condizioni di campo.

Abstract

La diagnosi di parassiti canini con potenziale zoonotico come Toxocara canis e Ancylostoma caninum in condizioni di campo è solitamente difficile a causa dell'accesso limitato a un laboratorio nelle aree rurali e suburbane del Messico. Questo studio mirava a rilevare T. canis e Ancylostoma spp. in campioni fecali raccolti da cani in Messico dal 2017 al 2021 in condizioni di campo. Il calcolo della dimensione del campione ha portato a un obiettivo di arruolamento di 534 cani in tutto il paese.

I campioni sono stati raccolti direttamente dal retto o dal terreno dopo la defecazione. I campioni sono stati conservati in sacchetti di plastica individuali ben sigillati a 4 °C. Una soluzione satura di cloruro di sodio (peso specifico [SpG] 1,20) è stata preparata sia in condizioni di campo che di laboratorio. Entro 3 giorni dalla raccolta, 2-4 g di feci sono stati testati per i parassiti utilizzando un metodo di flottazione sospendendo ogni campione fecale in una soluzione salina. Le feci sono state mescolate con la soluzione di flottazione e frantumate con un cucchiaio di metallo.

Una volta ottenuta una consistenza uniforme, il campione fecale è stato versato in un nuovo bicchiere di plastica utilizzando un setaccio e lasciato riposare per 10-15 minuti. Tre gocce dalla parte superiore della miscela sono state raccolte utilizzando un ciclo di inoculazione sterilizzato. I vetrini sono stati posizionati al microscopio e i parassiti sono stati identificati da parassitologi addestrati. I campioni fecali di 1.055 cani sono stati sottoposti a screening microscopico. Il numero di campioni positivi per Ancylostoma spp. è stato di 833 (frequenza del 78,95%) e di 222 (21,04%) per T. canis. Questi risultati illustrano l'importanza di identificare gli elminti zoonotici nei cani che vivono in aree urbane e rurali in Messico utilizzando una tecnica coproparassitoscopica in laboratorio e in condizioni di campo.

Introduzione

I parassiti gastrointestinali sono uno dei problemi di salute più comuni che colpiscono i cani1. Le stime suggeriscono che ci sono ~ 700 milioni di cani domestici in tutto il mondo e circa 175 milioni possono essere classificati come free-roaming2. Più di 60 specie di parassiti sono condivise tra cani ed esseri umani, suggerendo che i cani potrebbero essere una fonte di infezione per gli esseri umani con questi parassiti3. Toxocara canis e Ancylostoma caninum sono due specie parassitarie che infettano i cani e, accidentalmente, gli ospiti umani. Attualmente, ci sono diversi studi....

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Protocollo

L'uso e la cura dei cani è stato approvato dall'Università Nazionale e Autonoma del Messico.

1. Raccolta di campioni fecali

NOTA: Maneggiare il cane con l'aiuto di un veterinario o del proprietario dell'animale.

  1. Nel caso di cani selvatici (Figura 1A) o animali nervosi, raccogliere campioni da terra subito dopo la defecazione o non più di 10 minuti dopo.
  2. Lubrificare i guanti chirurgici o i sacchetti di polietilene a parete sottile con acqua o vaselina. Per raccogliere campioni fecali dal retto, indossare guanti chirurgici o sacchetti di polietilene....

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Risultati

In questo lavoro vengono descritte le procedure di raccolta e coproparassitoscopiche per l'identificazione di T. canis e Ancylostoma spp. La logica alla base dell'adattamento del semplice metodo di flottazione fecale per rilevare le uova di elminti canini è che questa tecnica è conveniente in quanto le soluzioni, le attrezzature e i materiali sono poco costosi. Pertanto, il metodo ha un'elevata capacità di gestione dei campioni in quanto è possibile processare più campioni in un breve periodo. Inoltre, .......

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Discussione

I nematodi come T. canis e Ancylostoma spp. possono abitare l'intestino tenue dei cani e hanno il potenziale per essere trasmessi all'uomo. I segni clinici causati da T. canis sono gravi nei cani giovani e si manifestano con scarsa crescita, problemi respiratori o lesioni del tratto digestivo28. Nei cani adulti, l'infezione tende in genere ad essere lieve. La diagnosi si basa sull'identificazione delle uova caratteristiche in un campione fecale. Questa condizione è una c.......

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno conflitti di interesse da rivelare.

Ringraziamenti

Gli autori sono grati alla Dirección General de Asuntos del Personal Académico dell'Universidad Nacional Autónoma de México per aver fornito le risorse finanziarie attraverso la sovvenzione PAPIIT IN218720 e alla dottoressa Claudia Mendoza per aver concesso la proroga richiesta. Questo lavoro è dedicato alla mia adorabile Nicole, scomparsa nel 2019. Vivrai sempre nel mio cuore.

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
3 batterie ricaricabili AA da 1,2 VEnergizzanteVenduto nei negozi
al dettaglio Bruciatore BunsenViresaFER-M224
Tazza di vetro usa e getta da 12 onceUline MessicoS-22275Venduto nei negozi al dettaglio
Vetrini Velab, MessicoVEP-P20
Anello di inoculazioneVelaQuin, MessicoCRM-5010PH 
Microscopio otticoVelaQuin, MessicoVE-B2
AccendinoBicJ25Venduto nei negozi al dettaglio
Un bicchiere di plastica (12 once)AmazonASIN B08C2CRHSHPuò essere qualsiasi bicchiere riutilizzabile in plastica da cucina
Bicchieri di plastica  (dimensioni di un dado o di una tazza per campioni di urina) diametro 5,5 cm e altezza 8,5 cm, due tazzeAmazonLayhit-Containers-ZYHD192919Può essere qualsiasi tazza riutilizzabile in plastica
da cucina Colino in plastica da 10 cmEckoASIN B00TUAAVWIPuò essere qualsiasi colino in plastica da cucina
Bottiglia di sodaCoca-Colada 1 litroVenduto nei negozi al dettaglio
CucchiaioAmazon BasicsASIN B00TUAAVWIPuò essere qualsiasi cucchiaio da cucina
Sale da cucinaLa FinaVenduto nei negozi al dettaglio

Riferimenti

  1. Duncan, K. T., Koons, N. R., Litherland, M. A., Little, S. E., Nagamori, Y. Prevalence of intestinal parasites in fecal samples and estimation of parasite contamination from dog parks in central Oklahoma. Veterinary Parasitology Regional Studies and Reports. 19, 100362(2020).
  2. Kisiel, L. M., et al.

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Ristampe e permessi

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