Il modello murino di epatectomia parziale 2/3 (66%) è ben descritto in letteratura, ma sono state raramente utilizzate epatectomie più estese che imitano la sindrome di piccole dimensioni dopo trapianto di fegato. Descriviamo una procedura di epatectomia estesa al 78% in un modello murino che si traduce in circa il 50% di letalità postoperatoria nei topi sani.
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Articolo metodologico
Epatectomia estesa al 78% in un modello chirurgico murino
In questo articolo
Sommario
Abstract
L'epatectomia parziale 2/3 nei topi viene utilizzata nella ricerca per studiare la capacità rigenerativa del fegato ed esplorare gli esiti della resezione epatica in una serie di modelli di malattia. Nella classica epatectomia parziale 2/3 nei topi, due dei cinque lobi epatici, vale a dire i lobi sinistro e mediano che rappresentano circa il 66% della massa epatica, vengono resecati in blocco con una sopravvivenza postoperatoria attesa del 100%. Le epatectomie parziali più aggressive sono tecnicamente più impegnative e, quindi, sono state raramente utilizzate nei topi. Il nostro gruppo ha sviluppato un modello murino di una tecnica di epatectomia estesa in cui tre dei cinque lobi epatici, inclusi i lobi superiore sinistro, mediano e destro, vengono resecati separatamente per rimuovere circa il 78% della massa epatica totale. Questa resezione prolungata, in topi altrimenti sani, lascia un fegato residuo che non può sempre sostenere una rigenerazione adeguata e tempestiva. La mancata rigenerazione si traduce infine in una letalità postoperatoria del 50% entro 1 settimana a causa di insufficienza epatica fulminante. Questa procedura di epatectomia estesa al 78% nei topi rappresenta un modello chirurgico unico per lo studio della sindrome small-for-size e la valutazione di strategie terapeutiche per migliorare la rigenerazione epatica e gli esiti nel contesto del trapianto di fegato o della resezione epatica estesa per cancro.
Introduzione
I modelli di resezione epatica chirurgica su topi e ratti, descritti per la prima volta nel 1931, sono i modelli sperimentali più comuni utilizzati per studiare le basi molecolari della rigenerazione epatica. Potrebbero anche essere utili nella ricerca scientifica traslazionale per testare e sviluppare strategie per migliorare i risultati dopo una resezione epatica estesa o il trapianto di innesti epatici non ottimali 1,2,3,4. Le epatectomie parziali (PH) nei topi comportano la rimozione di circa 2/3 (66%) della massa epatica totale (TLM), c....
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Protocollo
I metodi descritti all'interno di questo protocollo di procedura sono stati approvati dal Comitato Istituzionale per la Cura e l'Uso degli Animali (IACUC) presso il Beth Israel Deaconess Medical Center (BIDMC). Tutti gli esperimenti sono stati completati in conformità con le linee guida IACUC e BIDMC della struttura di ricerca sugli animali.
1. Preparazione preoperatoria del topo
- Radere l'addome del topo dalla metà dello sterno alla regione sovrapubica con un tagliaunghie.
- Indurre l'anestesia generale con isoflurano all'1-4% in ossigeno al 100%. Una volta anestetizzato, posizionare il topo supino sul cam....
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Risultati
Si prevede che un'epatectomia estesa al 78% di successo induca una mortalità del 50% entro 1 settimana in topi adulti sani di età compresa tra 8 e 12 settimane16. Se eseguita correttamente, ci si aspetta una perdita di sangue minima. Il sanguinamento residuo che persiste può essere controllato mediante pressione manuale. La morte perioperatoria entro 24 ore dall'intervento chirurgico è spesso causata da errori tecnici. I guasti tecnici includono lesioni involontarie ai grandi vasi sanguigni che ca.......
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Discussione
Per eseguire con successo un'epatectomia estesa al 78% che causa una letalità del 50% nei topi, è fondamentale che ogni lobo del fegato sia resecato con precisione. Questo livello di competenza e precisione può essere raggiunto solo se la procedura viene eseguita ripetutamente. La curva di allenamento varia tra gli operatori, ma in genere richiede 3-6 mesi di pratica. Una resezione epatica che rimuove meno del 78% del TLM comporterebbe tassi di sopravvivenza più elevati, mentre una resezione epatica che rimuove più del 7.......
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Dichiarazioni
Non ci sono conflitti di interesse da divulgare.
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato sostenuto dalle sovvenzioni NIH R01 DK063275 e HL086741 a CF. PB e TA sono beneficiari di una borsa di studio NRSA dal HL007734 di sovvenzione per la formazione NHLBI T32.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| 2 x 2 Garze | Covidien | 2146 | Chirurgia: dissezione |
| 5-O Nylon Monofilament Suture | Oasis | 50-118-0631 | Chirurgia: Chiusura della pelle |
| 5-O Silk Suture | Fine Science Tools | 18020-50 | Chirurgia: legatura del lobo epatico |
| 5-O Vicryl Suture | Ethicon | NC9335902 | Chirurgia: chiusura della parete addominale |
| Addson Ropeps | Braintree Scientific | FC028 | Chirurgia: dissezione |
| Tamponi imbevuti di alcol (2) | BD | 326895 | Disinfettante |
| Buprenorfina Formulazione a rilascio prolungato | Zoopharm | N/A | Analgesia |
| Cordless Trimmer | Braintree Scientific | CLP-9868-14 | Rasatura |
| Pinza curva | Braintree Scientific | FC0038 | Chirurgia: dissezione |
| Emostatico | Braintree Scientific | FC79-1 | Chirurgia: dissezione |
| Isoflurano Anestetico inalante | Patterson Veterinary | RXISO-250 | anestesia generale |
| (2 slot) (2) | Braintree Scientific | ACD-001 | Chirurgia: per contenere piccoli divaricatori |
| Fissatore magnetico (4 slot) | Braintree Scientific | ACD-002 | Chirurgia: per tenere piccoli divaricatori |
| Microforbici | Braintree Scientific | SC-MI 151 | Chirurgia: dissezione |
| Vassoio operatorio | Braintree Scientific | ACD-0014 | Chirurgia: per l'istituzione del campo chirurgico |
| Povidone Iodio 10% Tampone (2) | Medline | MDS093901ZZ | Disinfettante |
| Bisturi (15 lame) | Aspen Surgical Products | 371615 | Chirurgia: dissezione |
| Forbici affilate (curve) | Braintree Scientific | SC-T-406 | Chirurgia: dissezione |
| Forbici affilate (diritte) | Braintree Scientific | SC-T-405 | Chirurgia: dissezione |
| piccola Applicatori con punta in cotone Fisher | Scientific | 23-400-118 | Chirurgia: |
| dissezione Pinze per tessuti (diritte x2) | Braintree Scientific | FC1001 | Chirurgia: dissezione |
| Cuscinetto riscaldante (18" x 26") | Stryker | TP 700 | Pompa |
| riscaldante | Stryker | TP 700 | |
| Divaricatore con impugnatura a filo riscaldante (2) | Braintree Scientific | ACD-005 | Chirurgia: per facilitare l'esposizione della cavità peritoneale |
| Xenotec Isoflurane Small Animal Anesthesia | Braintree Scientific | EZ-108SA | Anestesia generale: contiene vaporizzatore e console di isoflurano, camera di induzione, regolatore/tubo flessibile, maschera facciale (M) |
Riferimenti
- Martins, P. N., Theruvath, T. P., Neuhaus, P. Rodent models of partial hepatectomies. Liver Int. 28 (1), 3-11 (2008).
- Higgins, G., Anderson, R. Experimental pathology of the liver I. Restoration of the liver of the white rat following partial surgical removal.
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Ristampe e permessi
