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Articolo metodologico

Metodi per tatuare lo Xenopus laevis con una macchinetta rotativa per tatuaggi

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DOI:

10.3791/67086

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28 giugno 2024

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In questo articolo

Sommario

Qui, descriviamo i metodi per tatuare Xenopus laevis adulto (rana artigliata africana) con una macchinetta per tatuaggi rotante. Un tatuaggio corretto si traduce in numeri scuri e facilmente leggibili che durano per diversi mesi e rendono gli animali facilmente distinguibili per scopi di ricerca e registrazione.

Abstract

I modelli animali ampliano l'ambito della ricerca biomedica, migliorando la nostra comprensione della biologia dello sviluppo, molecolare e cellulare e consentendo ai ricercatori di modellare le malattie umane. La registrazione e il monitoraggio dei singoli animali consente ai ricercatori di ridurre il numero di animali necessari per lo studio e di perfezionare le pratiche per migliorare il benessere degli animali. Esistono diversi metodi ben documentati per marcare e rintracciare i mammiferi, tra cui la punzonatura delle orecchie e i marchi auricolari. Tuttavia, i metodi per marcare le specie di anfibi acquatici sono limitati, con le risorse esistenti obsolete, inefficaci o proibitive. In questo manoscritto, descriviamo i metodi e le migliori pratiche per marcare lo Xenopus laevis con una macchinetta rotativa. Un tatuaggio corretto si traduce in tatuaggi di alta qualità, rendendo gli individui facilmente distinguibili per i ricercatori e ponendo un rischio minimo per la salute degli animali. Evidenziamo anche le cause dei tatuaggi di scarsa qualità, che possono portare a tatuaggi che sbiadiscono rapidamente e causano danni inutili agli animali. Questo approccio consente a ricercatori e veterinari di marcare gli anfibi, consentendo loro di tracciare le repliche biologiche e le linee transgeniche e di tenere registri accurati della salute degli animali.

Introduzione

I modelli animali sono strumenti utili per indagare su questioni relative alla salute umana. In pratica, la ricerca biomedica che utilizza modelli animali richiede un'attenta organizzazione e il mantenimento di una colonia animale sana. Le migliori pratiche per la gestione e l'allevamento etico degli animali mirano a ridurre il numero di animali necessari per la sperimentazione e a perfezionare le pratiche per garantire il benessere degli animali1. Il genere della rana artigliata, tra cui Xenopus laevis (X. laevis; Rana artigliata africana) e Xenopus tropicalis (X. tropicalis; Rana artigliata occidentale), so....

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Protocollo

Tutte le procedure per gli animali descritte sono state approvate dal Comitato istituzionale per la cura e l'uso degli animali del Dartmouth College.

1. Configurazione dell'attrezzatura

NOTA: Sono inclusi un flusso di lavoro per la procedura e un esempio di configurazione del banco (Figura 1).

  1. Collegare la pistola per tatuaggi e il pedale all'alimentazione. Posizionare il pedale sotto la superficie di lavoro.
  2. Assemblaggio della pistola per tatuaggi
    1. Utilizzando una chiave a brugola o un cacciavite esagonale, allentare le viti nell'impugnatur....

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Risultati

I tatuaggi di alta qualità avranno tratti scuri e leggibili sul petto della rana e possono essere chiaramente differenziati da diversi metri di distanza (Figura 5A). In generale, i numeri e i segni più grandi sono migliori per la leggibilità, ma i nomi e i numeri più lunghi possono essere rimpiccioliti per adattarsi comodamente al petto della rana. La longevità del tatuaggio è più difficile da giudicare, ma i tatuaggi di rana di alta qualità dovrebbero rimanere scuri e leggibili per almeno 3.......

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Discussione

Tatuare gli esseri umani è una forma d'arte che risale a migliaia di anni fa e, da quando gli esseri umani si tatuano, hanno anche tatuato o marchiato animali23. Le attrezzature e le tecniche per marcare gli animali, in particolare i mammiferi, sono ben consolidate, ben documentate e ampiamente accessibili. Mentre la marcatura degli animali era originariamente per distinguere il bestiame e i deterrenti contro i furti23, il suo ruolo nella ricerca biomedica è diventato altre.......

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Dichiarazioni

Gli autori dichiarano di non avere interessi concorrenti.

Ringraziamenti

Ringraziamo il Centro per la Medicina Comparata e la Ricerca del Dartmouth College per aver fornito l'allevamento quotidiano degli animali utilizzati in questo protocollo. Ringraziamo anche Leah Jacob e Adwaita Bose per il loro aiuto nel testare il protocollo e fotografare gli animali. Infine, ringraziamo il laboratorio di Ann Miller per la formazione nella pratica del tatuaggio. Questo lavoro è stato sostenuto dalla sovvenzione NIH R00 GM147826 a J.L.

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
3 fodere rotonde ad agoWorldwide Tattoo Supply1203RLBConfezionato sterile
aghi rotondo monouso ULTRAWorldwide Tattoo SupplyHTIPRS5-UConfezionato sterile
5 aghi tondo fodereWorldwide Tattoo Supply1205RLBConfezionato sterile
7 aghi tondoWorldwide Tattoo Supply1207RLBConfezionato sterile
Clip CordWorldwide Tattoo SupplyN/A
PedaleWorldwide Tattoo SupplyN/A
InkpotsWorldwide Tattoo SupplyN/A
Kimwipes, salviette delicate FisherScientific06-666A
RCA ConnectionWorldwide Tattoo SupplyN/A
Scream Ink Pitch Black, 1ozWorldwide Tattoo SupplySI101
Bicarbonato di sodio (NaHCO3)Sigma-AldrichS5761
Manopole in acciaio inoxWorldwide Tattoo SupplyN/A
Stealth 2.0 Rotary Tattoo MachineTattoo Supply in tutto il mondoN/A
Stealth 2.0 Rotary Tattoo Machine Box SetWorldwide Tattoo SupplySTEALTH2-SET
Isola di polistiroloN/AN/AQuesto è il coperchio di un container di spedizione freddo in polistirolo
Tricaina (etile 3-amminobenzonato metanolfato)Sigma-AldrichE10521ATTENZIONE: IRRITANTE
Tovaglioli di carta non sbiancati Grainger2U229Gli asciugamani di carta DEVONO essere non sbiancati, la candeggina è tossica per gli anfibi
Voltage SupplyWorldwide Tattoo SupplyN/A
Flacone da lavare (con acqua sicura per le rane)Fisher Scientific FB0340923TL'acqua sicura per le rane è declorata, pH 7,0-8,5, conducibilità 1200-1800 uS
X. laevis femmina adultaXenopus1N/A
Sacchetto di plastica con cernieraN/AN/AQuesta borsa deve essere abbastanza grande da contenere l'isola di polistirolo
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Riferimenti

  1. Hubrecht, R. C., Carter, E. The 3Rs and humane experimental technique: Implementing change. Animals (Basel). 9 (10), 754(2019).
  2. Elkan, E. R. The Xenopus pregnancy test. British Med J. 2, 1253-1256 (1938).
  3. Vize, P. D., Zorn, A. M.

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Ristampe e permessi

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