علينا أن نظهر أن التعبير أكثر من البشرة مستقبلات عامل النمو (EGFR) يعزز حركية من خلايا الجذعية العصبية (NSCs) باستخدام agarose هلام رواية الجهاز ميكروفلويديك القائمة. يمكن أن تكون قابلة للتكيف هذه التكنولوجيا بسهولة لغيرها من نظم خلايا الثدييات الخلية حيث قالت مصادر شحيحة ، مثل الخلايا الجذعية العصبية ، وبدوره حولها الساعة الحرجة.
في حين أن تكنولوجيا ميكروفلويديك هو التوصل إلى مستوى جديد من النضج لفحوصات الجزيئات ، خلية مقرها المقايسات لا تزال في مرحلة الرضع 1. هذا هو إلى حد كبير بسبب الصعوبة التي يمكن للمرء أن إنشاء خلية المكروية متوافق مع وثابتة باستخدام تقنيات التصنيع الدقيق والمواد التقليدية. علينا معالجة هذه المشكلة عن طريق ادخال مادة التصنيع الدقيق الرواية ، agarose هلام ، والمادة الأساسية للجهاز ميكروفلويديك. Agarose هلام هو طيع للغاية ، ونفاذا إلى الغاز والمواد المغذية الضرورية لبقاء الخلية ، وبالتالي مادة مثالية لخلية مقرها المقايسات. لقد أظهرنا سابقا أن الأجهزة agarose هلام تستند نجحت في دراسة جرثومية والعدلة الهجرة الخلية 2. في هذا التقرير ، هي منقوشة ثلاث قنوات ميكروفلويديك موازية في الغشاء agarose هلام سمك 1MM تقريبا. تتم المحافظة على تدفقات مستمرة مع وسائل الاعلام / العازلة في القنوات الجانبين باستخدام مضخة تمعجية. تتم المحافظة على الخلايا في قناة مركز للمراقبة. منذ المغذيات والمواد الكيميائية في القنوات الجانبية نشرها باستمرار من جانب إلى مركز القناة ، والبيئة الكيميائية للقناة المركز هو السيطرة عليها بسهولة عن طريق تدفق على طول قنوات جانبية. باستخدام هذا الجهاز ، ونحن إثبات أنه يمكن رصد حركة الخلايا الجذعية العصبية بصريا مع سهولة في ظل الظروف الكيميائية المختلفة ، والنتائج التجريبية تبين أن أكثر من التعبير البشرة مستقبلات عامل النمو (EGFR) يعزز من القدرة على الحركة من الخلايا الجذعية العصبية. حركية من خلايا الجذعية العصبية هي العلامات البيولوجية الهامة لتقييم الخلايا العدوانية ، وبالتالي عامل مكون للأورام 3. سوف فك رموز آلية حركية الغلة الكامنة NSC نظرة ثاقبة على حد سواء الاضطرابات العصبية والتنمية في سرطان الدماغ الجذعية غزو الخلايا.
التين. 1 يبين مسارات سلالات NSC الثلاثة ، الخلايا الأبوية ، وwtEGFR وΔEGFR على (السيطرة). تم الحصول على كل مجموعة من المسارات من الفيلم 5 ساعات طويلة. لخلايا الوالدين ، بلغت ذروتها عندما خلية حركية EGF كان تركيز ~ 10ng/ml ؛ wtEGFR للخلايا ، خلية حركية تحولت إلى ذروة 100ng/ml أو أعلاه ؛ ΔEGFR للخلايا ، وا?…
ويؤيد هذا العمل من قبل مكتب ولاية نيويورك للعلوم والتكنولوجيا والبحث العلمي (NYSTAR) (في شكل مركز التكنولوجيا المتقدمة منحة) ، والمنح المقدمة من مركز النانوية (NBTC) ، وهو برنامج للمجلس الوطنى لشركة الاتصالات السعودية مؤسسة العلم تحت رقم 9876771 – ECS الاتفاق ، واستئصال ورم من الدماغ الرابطة الأمريكية وأكاديمية نيويورك للطب (JAB).
Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Dulbecco’s Modified Eagle Medium (DMEM) (1X) | Reagent | Invitrogen | 11971-025 | |
CO2-independent media | Reagent | Invitrogen | 18045-088 | A non-HEPES proprietary medium suitable for supporting cell growth for a variety of epithelial, fibroblast, and lymphoid cell lines in atmospheric conditions, contains no L-glutamine |
Trypsin-EDTA | Reagent | Invitrogen | 25200-072 | |
PBS | Reagent | Invitrogen | 14190-144 | Phosphate-buffered saline, without calcium or magnesium |
Pen/Strep | Reagent | Invitrogen | 15140-122 | Contains 10,000 units of penicillin (base) and 10,000 g of streptomycin (base)/ml utilizing penicillin G (sodium salt) and streptomycin sulfate in 0.85% saline |
FBS | Reagent | Invitrogen | 10437-028 | Fetal Bovine Serum, Qualified |
Horse Serum | Reagent | Invitrogen | 16050-130 | Horse Serum, EIA tested (negative) serum |
Fibronectin | Reagent | Sigma-Aldrich | F0895 | Fibronectin from human plasma, also called cold insoluble globulin |
EGF | Reagent | Sigma-Aldrich | E4127 | Epidermal Growth Factor from murine submaxillary gland, lyophilized |
Agarose | Reagent | FisherScientific | BP1356-500 |