免疫ペルオキシダーゼアッセイを用いたヒトコロナウイルスの滴定

Summary

このビデオでは、我々は、免疫アッセイとして知られている酵素抗原の検出技術を使用して、ウイルスの検出とタイターのための代替方法を示しています。ここで、我々は、あなたのウイルスのサンプルを収集する方法を示して、テスト用のセルを準備し、最終的にウイルス力価を決定するために希釈系列を用いて免疫アッセイになります。

Abstract

感染性ウイルス力価の計算は、ウイルス学者のための基本と本質的な実験的なアプローチを表しています。古典的なプラークアッセイは、ヒトコロナウイルスの株229EとOC43（HCOV）の場合がそうですが、重要な細胞変性効果を、発生しないウイルスには使用できません。別の間接免疫ペルオキシダーゼアッセイ（IPA）がここにこれらのウイルスの検出と滴定のために説明されています。感受性細胞を96ウェルプレート中のサンプルのシリアル対数希釈で接種されています。ウイルス増殖の後、IPAによるウイルスの検出は、"組織培養感染量"（TCID50）として表される感染性ウイルスの力価を、得られます。これは、複製ウイルスが含まれている実験室の井戸の一連のどの半分でウイルス含有試料の希釈を表しています。この手法は、生体試料中のHCOVの滴定（細胞、組織または体液）のための信頼性の高い方法です。

Protocol

この実験的なアプローチのための完全なテキストのプロトコルがで可能ですシュプリンガープロトコル 。