Титрование по правам Коронавирусы Использование Иммунопероксидазное Пробирной

Summary

В этом видео, мы демонстрируем альтернативный метод для обнаружения и titering от вирусов с помощью ферментативного технику обнаружения антигена известный как иммунопероксидазного анализа. Здесь мы покажем вам, как собирать вирусную образцы, подготовить клетки для тестирования, и, наконец, иммунопероксидазного методом с использованием серийных разведений для определения вирусного титра.

Abstract

Расчет инфекционные вирусные титры представляет базовых и основных экспериментальных подхода для вирусологов. Классическая доска анализы не могут быть использованы для вирусов, которые не наносят существенного цитопатический эффект, который в случае штаммов 229E и OC43 от человека коронавирус (HCoV). Альтернативного анализа косвенных иммунопероксидазного (IPA) является описанное здесь для обнаружения и титрования этих вирусов. Чувствительные клетки инокулируют с серийным логарифмической разведения образцов в 96-луночного планшета. После вирусного роста, вирусные обнаружения АПИ дает инфекционным титром вируса, выраженное в "тканевой культуры инфекционная доза" (TCID50). Это означает разведение вируссодержащих образца при которой половина серии скважин лаборатории содержат репликации вируса. Этот метод является надежным методом для титрования HCoV в биологических образцах (клетки, ткани или жидкости).

Protocol

Полный текст протокола для этого экспериментальный подход доступен в протоколах Springer .