Separação eletroforética de proteínas

Summary

Neste vídeo, demonstramos um método para separação eletroforética de proteínas usando poli-acrylimide eletroforese em gel (PAGE).

Abstract

Eletroforese é usada para separar misturas complexas de proteínas (por exemplo, a partir de células, frações subcelulares, frações da coluna, ou imunoprecipitados), para investigar composições subunidade, e para verificar a homogeneidade das amostras de proteína. Ele também pode servir para purificar proteínas para uso em outras aplicações. Eletroforese em gel de poliacrilamida, as proteínas migram em resposta a um campo elétrico através de poros em uma matriz de gel de poliacrilamida; tamanho dos poros diminui com a concentração de acrilamida crescente. A combinação de tamanho dos poros e carga de proteína, tamanho e forma determina a taxa de migração da proteína. Nesta unidade, o método de Laemmli padrão é descrito por eletroforese em gel descontínua em condições de desnaturação, ou seja, na presença de dodecil sulfato de sódio (SDS).

Protocol

O protocolo de texto completo para essa abordagem experimental está disponível em protocolos atuais em Biologia Molecular .