مستدعى خلية كاملة تسجيلات الضوء التيارات متشابك مثير في شريحة الشبكية
Summary
هذا الفيديو يبين عملية خلية كاملة التسجيلات المشبك الجهد في شريحة الشبكية من السمندل النمر المائية. نبدي استعدادا لشريحة وكذلك كيفية تنفيذ تسجيلات المشبك التصحيح خلال التحفيز البصري لشبكية العين.
Abstract
نستخدم المشبك التصحيح خلية كاملة لدراسة تقنية الدارات متشابك التي ترتكز عليها معالجة المعلومات البصرية في الشبكية. في هذا الفيديو ، فإننا سوف دليل لكم من خلال عملية تنفيذ كامل الخلية تسجيلات ضوء التيارات أثار الخلايا الفردية في إعداد شريحة الشبكية. نستخدم نمر المائية السمندل كنموذج للحيوانات. نبدأ بوصف تشريح العين وكيفية عرض الشرائح هي التي شنت للتسجيلات الكهربية. مرة واحدة يتم وضع شريحة في غرفة تسجيل ، ونحن لشرح كيفية تنفيذ كامل الخلية التسجيلات المشبك الجهد. نحن المشروع ثم محفزات بصرية وعلى المستقبلات الضوئية في لانتزاع شريحة ضوئية أثار ردود الحالي. خلال تسجيل يروي لنا شريحة مع وكلاء الدوائية ، حيث نظام الارواء 8 قنوات تسمح لنا التبديل بسرعة بين وكلاء مختلفة. ويستخدم على نطاق واسع في إعداد شريحة الشبكية للتسجيلات المشبك التصحيح في شبكية العين ، لا سيما لدراسة الخلايا أو عديم الاستطالات القطبين ، والتي لا يمكن الوصول إليها في إعداد كامل جبل.
Protocol
Discussion
الفوائد :
- جميع أنواع الخلايا متاحة
- من السهل تحديد من أنواع الخلايا ، وبخاصة إذا تم إضافة صبغة الفلورسنت إلى الحل الكهربائي
- ويمكن الوصول بسهولة وكلاء الدوائية الخلاي?…
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Multiclamp 700A | Patch Clamp Amplifier | Molecular Devices | ||
| SZX9 | Dissection Micropscope | Olympus | ||
| BX50WI | Upright Microscope | Olympus | Equipped with 40x, 10x water immersion objective, fluorescent filters and mercury lamp | |
| P-97 | Micropipette Puller | Sutter Instruments | ||
| Lucivid | Microscope image injector | Mbf bioscience | ||
| 8-channel perfusion system | Microperfusion | Parker Hannfin corporation | ||
| Bits++ | Digital Video Processor | Cambridge Research Systems | ||
| Infrared Oculars | Altro | ITT | ||
| Adhesive silicone wells | Altro | Molecular Probes | 20mm diameter, 1.0mm deep | |
| Membrane Filters | Filter | Milipore | HAWPO1300 | .45µm HA |
| Borosilicate Glass Capillaries | Electrode glass | World Precision Instruments | 1B150-4 | |
| Syringe Filters | Filter | Whatman | 6789-0402 | 4mm filters, .2um Nylon Membrane, Polypropylene housing |
| IR camera | Micropscope mounted camera | Sony | SPT-M324 | Extrawave HAD, B7W video camera |
| Picrotoxin | Reagent | Sigma | P1675 | |
| Strychnine | Reagent | Sigma | S0532 | |
| Imidazole-4-acetic acid sodium salt | Reagent | Sigma | I7013 | |
| Larval tiger salamanders | Animal | Charles E. Sullivan (Nashville, TN) |
Riferimenti
- Cook, P. B., Lukasiewicz, P. D., McReynnolds, J. S. GABA(C) receptors control adaptive changes in a glycinergic inhibitory pathway in salamander retina. Journal of Neuroscience. 20, 806-812 (2000).
- Heflin, S. J., Cook, P. B. Narrow and wide field amacrine cells fire action potentials in response to depolarization and light stimulation. Visual Neuroscience. 24, 197-206 (2007).
- Ichinose, T., Shields, C. R., Lukasiewicz, P. D. Sodium Channels in the Transient Retinal Bipolar Cells Enhance Visual Responses in Ganglion Cells. J Neurosci.. 25, 1856-1865 (2005).
