TRE重组酶的分子进化
Summary
在这里，我们报告TRE重组，通过定向，分子进化的一代。 TRE重组确认的HIV – 1病毒DNA的LTR序列内的一个预先定义的目标序列，切除和消灭前病毒从被感染的人体细胞。尽管还处于起步阶段，定向分子进化将允许创建自定义的酶，将作为分子的外科手术和分子医学工具。
Abstract
在这里，我们报告TRE重组，通过定向，分子进化的一代。 TRE重组确认的HIV – 1病毒DNA的LTR序列内的一个预先定义的目标序列，切除和消灭前病毒从被感染的人体细胞。
我们开始与CRE，一个38 kDa的重组，即承认一个34 bp的双链DNA序列loxP位知名。由于Cre重组可以有效地消除基因组序列，我们制定了一个可以去除5' – LTR和3' – LTR一个集成的HIV – 1病毒DNA序列之间的重组，裁缝。作为第一步，我们发现类似loxP位和重组活动测试的LTR网站内的序列。最初CRE和诱变的Cre库未能重组的HIV – 1病毒DNA的选择loxLTR网站。任何指示的分子进化过程的开始，至少需要剩余的活动，原来的非对称loxLTR序列分割成子集和测试再次重组活动。作为中间体，重组活动子集。通过反复的演进周期，接下来，重组图书馆丰富。随后，丰富图书馆的洗牌和重组。结合不同的突变，证明了协同和重组酶的重组loxLTR1和loxLTR2创建。这是证据，通过中间体的进化策略可以成功。共126演化周期后，个别重组酶功能和结构分析。最活跃的重组 – TRE – 创建19个氨基酸的改变。 TRE重组能够消费的HIV – 1前病毒基因组的HIV – 1感染的HeLa细胞（见“HIV – 1前病毒DNA切除使用一个演进的重组酶”，Hauber J.，海因里希Pette实验病毒学和免疫学研究所，德国汉堡）。虽然还处于起步阶段，定向分子进化将允许创建自定义的酶，将作为“分子手术”和分子医学工具。
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
