लाइव immobilized खमीर कक्ष के विज़ुअलाइज़ेशन के लिए एक रैपिड तकनीक
Summary
बढ़ रही immobilized खमीर कोशिकाओं के दृश्य के लिए एक तेजी से तकनीक, यहाँ चुप संभोग loci HML और HMR में फ्लोरोसेंट पत्रकारों से लागू
Abstract
हम यहाँ स्थिरीकरण और epifluorescence माइक्रोस्कोपी द्वारा बढ़ती खमीर कोशिकाओं के दृश्य के लिए एक सरल, तेजी से है, और अत्यंत लचीला तकनीक मौजूद है. यह तकनीक समान रूप से स्थैतिक खमीर आबादी या लंबाई में दस घंटों के लिए समय पाठ्यक्रमों प्रयोगों के दृश्य के लिए उपयुक्त है. मेरा माइक्रोस्कोपी एस cerevisiae में मूक संभोग loci में epigenetic इनहेरीटेंस जांच. दो मूक संभोग loci, HML और HMR, जो आम तौर पर व्यक्त कर रहे हैं के रूप में वे heterochromatin में पैक कर रहे हैं नहीं कर रहे हैं. Sir1 उत्परिवर्ती पृष्ठभूमि मुंह बंद करने में कमजोर हो रहा है ऐसी है कि प्रत्येक ठिकाना या तो व्यक्त या खामोश epigenetic राज्य में किया जा सकता है, तो एक पूरे के रूप में जनसंख्या में HML और HMR दोनों के लिए अलग epigenetic राज्यों की कोशिकाओं के एक मिश्रण है. मेरा माइक्रोस्कोपी दिखा दिया है कि वहाँ एक व्यक्ति के सेल में HML और HMR के epigenetic राज्य के बीच कोई संबंध नहीं है. sir1 कोशिकाओं stochastically epigenetic राज्यों स्विच करने के लिए, पहले व्यक्त ठिकाना पर मुंह बंद करने की स्थापना या एक पहले खामोश ठिकाना व्यक्त. मेरा समय बेशक माइक्रोस्कोपी व्यक्तिगत sir1 कोशिकाओं और उनके वंश पर नज़र रखी चार संभव epigenetic स्विच के प्रत्येक आवृत्ति, और इस प्रकार sir1 कोशिकाओं में epigenetic राज्यों में से प्रत्येक की स्थिरता स्कोर. Xu एट अल. Mol. 2006 सेल.
Protocol
Discussion
यह एक तेजी से तकनीक है कि खमीर कोशिकाओं immobilizes जबकि अभी भी विकास की अनुमति है. हम दस घंटे के लिए खमीर के विकास का पालन किया है, खमीर प्रयोग भर में जंगली प्रकार विभाजन दरों को प्रदर्शित करने के साथ,. ध्यान दें कि इस से?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
हम अपने सभी मदद के लिए पीट ह्यूस्टन और Eugenia Xu धन्यवाद देना चाहूंगा.
Riferimenti
- Xu, E. Y., Zawadzki, K. A., Broach, J. R. Single-cell observations reveal intermediate transcriptional silencing states. Mol. Cell. 23, 219-229 (2006).
