التجسيمي جراحة للبقاء في القوارض
Summary
رصد مستويات الناقلات العصبية في المخ في مناطق خارج الخلية متميزة من التحرك بحرية حيوانات يقدم رؤى حول الربط بين الافراج عن العصبي والسلوك. في الجسم الحي microdialysis مقرونا الكشف الكهروكيميائية التشريحية ممتازة ويوفر القرار الكيميائية ، ومعلومات عن كيفية تغيير العصبي القاعدية بواسطة التلاعب الدوائية أو الفسيولوجية.
Abstract
The ability to measure extracellular basal levels of neurotransmitters in the brain of awake animals allows for the determination of effects of different systemic challenges (pharmacological or physiological) to the CNS. For example, one can directly measure how the animal’s midbrain dopamine projections respond to dopamine-releasing drugs like d-amphetamine or natural stimuli like food. In this video, we show you how to implant guide cannulas targeting specific sites in the rat brain, how to insert and implant a microdialysis probe and how to use high performance liquid chromatography coupled with electrochemical detection (HPLC-EC) to measure extracellular levels of oxidizable neurotransmitters and metabolites. Local precise introduction of drugs through the microdialysis probe allows for refined work on site specificity in a compound s mechanism of action. This technique has excellent anatomical and chemical resolution but only modest time resolution as microdialysis samples are usually processed every 20-30 minutes to ensure detectable neurotransmitter levels. Complementary ex vivo tools (i.e., slice and cell culture electrophysiology) can assist with monitoring real-time neurotransmission.
Protocol
Discussion
microdialysis في الجسم الحي هو الأداة المفضلة لقياس العصبية والأيضات متعددة في مواقع مختلفة من الدماغ حيوان حي. ومع ذلك ، فإنه يرصد فقط مستويات من خارج الخلية neurochemicals وأنها لا توفر الوقت لرصد قرار إيماس العصبي في الوقت الحقيقي. من خلال إصدار من تقنية تسمى "صافي تدفق" ، يمكن حساب تر…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
بدعم من DK065872 (ENP) ، ومؤسسة عائلة سميث جائزة التميز في البحوث الطبية الحيوية (ENP) ، F31 DA023760.
Riferimenti
- Bungay, P. M., Newton-Vinson, P., Isele, W., Garris, P. A., Justice, J. B. Microdialysis of dopamine interpreted with quantitative model incorporating probe implantation trauma. J. Neurochem. 86, 932-946 (2003).
- Chen, K. C. Effects of tissue trauma on the characteristics of microdialysis zero-net-flux method sampling neurotransmitters. Journal of Theor. Biology. 238, 863-881 (2006).
- Geiger, B. M., Behr, G. G., Frank, L., Caldera-Siu, A. D., Beinfeld, M. C., Kokkotou, E. G., Pothos, E. N. Evidence for defective mesolimbic dopamine exocytosis in obesity-prone rats. FASEB Journal. 8, 2740-2746 (2008).
- Pothos, E. N., Creese, I., Hoebel, B. G. Restricted eating with weight loss selectively decreases extracellular dopamine in the nucleus accumbens and alters dopamine response to amphetamine, morphine and food intake. The Journal of Neuroscience. 15, 6640-6650 (1995).
