Рассечение и роста клеток от отдельной области мозга облегчает исследование клеточных и физиологических параметров. Мы опишем метод культивирования первичных клетка, которая производит нейрона обогащенного культур в свободной от сыворотки среде.
Abstract
Физиологических свойств нейронов гиппокампа, как правило, изучения, в особенности из-за участия гиппокампа в процессе обучения и памяти. Первичная гиппокампа культивирования клеток позволяет неврологи изучить деятельность и свойств нейронов на отдельные клетки и одного уровня синапс. В этом видео мы продемонстрируем, как изолировать и выращивать первичные клетки гиппокампа новорожденных крыс. Гиппокампе может быть изолированы друг от новорожденных животных в максимально короткий от 2 до 3 минут, и культуры могут быть сохранены на срок до двух недель. Мы также вкратце показать, как использовать эти нейроны гиппокампа для логометрических изображений кальция. Хотя этот протокол описывает процесс гиппокампа, с практически никаких изменений, он может быть применен в других регионах мозга.
Protocol
До гиппокампа изоляции Перед началом гиппокампа изоляции, убедитесь, что все инструменты стерильны. Спрей вниз культуры капюшон с 70% этанола и поместить средства внутри капота. Вам нужно будет 6 – и 10-см чашки Петри, стерильные поли-L покрытием покровные стекла, пипетки и со?…
Discussion
Этот протокол был разработан как модификация оригинальной работе Гэри Банкир и Ким Гослин 1. Эта книга является важнейшим ресурсом для всех, кто интересуется культивирования клеток – не только нейрон обогащенного культур описаны в текущем протоколе.