Beredning av 2-dGuo-behandlade Thymus Organ kulturer

Summary

Denna video visar dissekering och borttagning av fostrets bräss samt beredning av ex vivo kulturer av 2-dGuo behandlade bräss.

Abstract

I bräss, omogna CD4 8 + tymocyter uttrycka slumpmässigt ordnas T-cells receptor α-och b-kedjan gener genomgå positiva och negativa urval händelser baserat på deras förmåga att känna igen komplexa self-peptide/major histocompatibility (MHC) molekyler som uttrycks av thymic stromaceller. In vivo analys av den roll som thymic stromaceller under intrathymic val försvåras av det cellulära komplexitet thymic mikromiljön i steady-state vuxna bräss, och av bristen på lämpliga rikta strategier för att manipulera genuttryck i synnerhet thymic stromal fack. Vi har visat att thymic mikromiljön lätt kan manipuleras in vitro genom att använda reaggregate bräss orgel kulturer, som möjliggör framställning av tredimensionella bräss loberna från definierade stromaceller och lymfoida celler. Även om andra in vitro-system stöder vissa aspekter av T-cells utveckling, reaggregate bräss orgel kulturen är fortfarande den enda in vitro-system kunna stödja effektiva MHC klass I och II-medierad tymocyt händelser val, och så kan användas som ett effektivt verktyg för att studera den cellulära och molekylära regleringen av positiva och negativa val i bräss.

Protocol

Besök Springer protokoll för mer information om beredning av ex vivo bräss orgel kulturer.