입양 DTH의 유도 후 귀에 영상 효과기 메모리 T 세포
Summary
여기서 우리는 쥐의 귀에 지연 유형 과민성 (DTH) 반응의 진행 상황을 유도하고 기록하는 방법을 보여줍니다. 이것은 이펙터 / 메모리 T 세포 응답의 2 광자 이미징을위한 쥐의 귀 조직의 준비 시범옵니다.
Abstract
효과기 / 메모리 T의 lymphocytes – 지연 유형 과민성 (DTH)은 주요 선수들이 CCR7하는 면역 반응이다. 여기, 우리는 쥐의 귀에 DTH 반응의 진행 상황을 유도하고 기록하는 방법을 보여줍니다. 효과기 / 메모리 T 세포 응답 – 이것은 CCR7의 2 광자 이미징을위한 쥐의 귀 조직의 준비 시범옵니다.
효과기 / 메모리 T 세포 라인 (비튼, C J. 시각 실험, 이슈 8) – 입양 DTH는 GFP – 레이블 OVA 특정 CCR7의 intraperitoneal 주사로 유도합니다. 전지는 다음 시각화를 허용하도록 텍사스 – 레드에 OVA와 OVA 복합의 1:1 혼합 (OVA – TR)과 호수 (제어 EAR)과 다른 하나의 귀를 주사하여 도전하기 전에 48 시간 동안 쥐의 평형을 사용할 수 있습니다 주민 항원 제시 세포.
우리는 영상 두번째 고조파 생성하여 콜라겐 섬유의 시각화와 함께 면역 반응 동안 피부 깊은 계층 내에서 세포의 운동성 유용 조직 준비 방법을 설명합니다. 귀 조직은 5 X 5mm의 사각형 (약간 큰 더이다)로 절단 후 37 이미징 챔버에 실리콘 그리스를 사용하여 보안과 산소 – 부풀어 오른 조직 문화 매체에 의해 superfused 아르 Vetbond ™를 사용하여 플라스틱 커버 미끄러져에 탑재되어 ° C .
Protocol
Riferimenti
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