研究与基于荧光素酶的记者基因检测膜生源

Summary

在这里，我们描述基于荧光素酶报告基因的使用自Promega的双GloTM荧光素酶检测系统的方法研究细胞的吞噬功能，诱导基因表达的变化的过程。

Abstract

要研究膜生物合成的过程中，协调不同的脂质合成途径，它是有用的工作与实验系统，膜生物合成和诱导的方式迅速发生。我们已经发现，细胞迅速合成膜脂，以补充失去了作为包装材料在颗粒吞噬膜池的乳胶珠的吞噬功能是为这些目的的实际。在这里，我们描述基于荧光素酶报告基因的使用自Promega双GLO的萤光素酶检测系统的方法研究细胞的吞噬功能，诱导基因表达的变化的过程。

Protocol

细胞培养人类胚胎肾293（HEK293）细胞联合文化是生长在10 – cm的文化菜“中小型一个”贝科的修改鹰的中等辅以一个抗生素鸡尾酒（100单位每青霉素毫升和100微克（DMEM）组成，每毫升硫酸链霉素）和10％胎牛血清（FBS）。 要成立一个实验的细胞，中期是吸，细胞两次洗净，用5毫升磷酸缓冲液（PBS）的解决方案。 PBS是然后取出，用0.6毫升含0.25％胰蛋白酶溶液取代。 这道…