Summary

大槽マウスでの脳脊髄液のシリアル収集のためのテクニック

Published: November 10, 2008
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Summary

ADのトランスジェニック(Tg)マウスモデルでは、病気は人間の患者で進行するにつれてどのように、なぜCSFの変化でAβやタウのレベルを調査するために素晴らしい機会を提供しています。ここで、我々は、マウスからシリアルCSFのサンプリングのための洗練された大槽穿刺のテクニックを示しています。

Abstract

アルツハイマー病(AD)は、病理学的にβ-アミロイドペプチド(Aβ)と過リン酸化タウタンパク質の神経細胞内蓄積の細胞外沈着によって特徴づけられる進行性神経変性疾患である。脳脊髄液(CSF)は脳の細胞外空間と直接接触しているので、それは病理学的プロセスに対応して脳内の生化学的変化を反映しています。これらの変化の原因のメカニズムはまだ完全には理解されていないものの、AD患者のCSFは、42アミノ酸Aβ(Aβ42)の形態、および総タウと過リン酸化タウの増加の減少を示しています。 ADのトランスジェニック(Tg)マウスモデルでは、どのように、なぜAβやタウのレベルCSFの変化で病気の進行状況に応じて調査する絶好の機会を提供しています。ここで、我々は、マウスからの脳脊髄液のサンプリングのための洗練された大槽穿刺のテクニックを示しています。この非常に穏やかなサンプリング手法は、シリアルCSFのサンプルが大幅にそれが可能な時間をかけて微妙な変化を検出すること、Aβまたはタウのレベルでの間に、マウスの変動の交絡影響を最小化する2〜3カ月ごとに同一のマウスから取得することを可能とする。 AβとタウELISAとの組み合わせで、この手法は、ADのマウスモデルにおける脳内のCSFAβ42とタウのレベルとの関係、およびそれらの代謝を調査するために設計された研究に有用となります。 Tgマウスの研究では、監視の病気の進行のための生物学的マーカーとして使用されるCSFのAβやタウのレベルの潜在的なまでに重要な検証を提供することができる、そして治療的介入の効果を監視する。マウスを屠殺することができ、脳の生化学的または組織学的変化を調べることができるように、CSFの変化のメカニズムは良く評価することができる。これらのデータは、ヒトADの脳脊髄液の変化の解釈のために有益であると思われる。

Protocol

ガラスキャピラリーチューブを引っ張る ガラスキャピラリーチューブはサターインストゥルメント社(ホウケイ酸ガラス、B100 – 75 – 10)から購入しています。 300で設定された熱指数と330で設定された圧力の指数で、マイクロピペットプラー迸るサターP – 87キャピラリーチューブを引き出します。 テーパー先端が約0.5 mmの内径を持つように、はさみでガラスキャピラリー?…

Discussion

我々は、検出可能なプラズマ汚染することなくマウスからのCSFのシリアルサンプリングするための信頼性の高いプロトコルを説明。

1。全体の手順は、通常、マウスあたり10分(麻酔を含む)を取ります。 CSF得られたの体積は、マウス系統に依存しています。 P301L(JNPL3)マウス3が約10μL-15μlの収率を得た一方、PS / APPダブルTgマウスではused2、平均容積は、約5μL(3〜7μL)です。シリアルサンプリング?…

Acknowledgements

私たちの活動は、NIHの助成金NS048447とAG017216to KDによってサポートされています。里六は、オリジナルのプロトコルの開発中に、彼の監督と支援のために博士ヘイッキTanilaを(クオピオ大学、クオピオ、フィンランド)に感謝いたします。

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Citazione di questo articolo
Liu, L., Duff, K. A Technique for Serial Collection of Cerebrospinal Fluid from the Cisterna Magna in Mouse . J. Vis. Exp. (21), e960, doi:10.3791/960 (2008).

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