È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Capitoli
- 00:00Titolo
- 00:09Introduction
- 01:05T Cell Staining
- 03:21Reagents and Equipment
- 05:44Assemble Materials and Equipment at Workspace
- 06:04Step 1: PBMC Isolation
- 08:51Step 2: CD4+ Cell Separatioin
- 11:01Step 3: In Vitro Expansion Culture
- 13:34Step 4: Visualizing T Cells by Tetramer Staining
- 15:33Conclusion
Эта процедура демонстрирует очистки и в лабораторных условиях расширения антиген специфических CD4 + Т-клеток из цельной периферической крови и их визуализации с помощью МНС класс II тетрамеров. Тетрамеров разрешение прямой визуализации Т-клеток с одной специфичности антигенов и определены MHC класса II ограничений.
Tags
CD4+ T CellsMHC Class II TetramersAntigen SpecificFlow CytometryPeptide Loaded MHCT-cell ReceptorStreptavidinStaining ReagentsIn Vitro AmplificationMononuclear CellsPeripheral BloodFicoll UnderlayNegative SelectionBiotinylated Antibody CocktailMagnetic BeadsAdherent CellsAntigen Presenting CellsIL-2Surface AntibodiesFlow Cytometry Analysis
