İnsan Embriyonik Kök Hücre (ES) yayılması

Evet, ben Lauren Deon. MGH'deki İnsan Amgen kök hücre ortak tesisinden sorumluyum. Evet, ben Lauren, MGH'deki Human kök hücre ortak tesisinden sorumluyum.

Daha önce George De Lab'da doktora sonrası araştırmacı olduğumdan beri, dört, dört yıldır insan Amgen kök hücreleri üzerinde çalışıyorum. Ve şu anda iki hücre hattımız var, H bir ve H dokuz, her ikisi de Y hücresinden. Ve bu hücreleri kültürde genişletme veya sürdürme şeklimiz, en azından bu hücreleri bölme şeklimiz kollajen kullanmaktır.

Bu yüzden genellikle yaptığım şey, hücreleri attıktan sonraki ilk birkaç pasajda, teknik bir şey olan kolonileri toplamak. Bu durumda, mikroskop altında hangi kolonilerin iyi, farklı ve güzel şekilli olduğunu kontrol edebilirim ve sadece bu kolonileri toplayacağım ve onları birkaç parçaya bölüp taze bir daireye geri koyacağım. Ve onu farklı gibi görünen koloniler, onları yalnız bırakıyor.

Hücreleri geçirmenin diğer yolu tripsin kullanmaktır. Bu yüzden burada bu tekniği kullanmıyorum. Kollajenazın biraz daha güvenli olduğunu düşünüyorum çünkü insan kök hücreleri bireyselleşmeyi sevmez veya yalnız kalmayı sevmez.

Yani tripsin yaparsanız, tripsini biraz fazla uzun süre kullanırsanız, üç ila dört dakika kadar kullanırsanız, ki bu diğer tür hücreler için şeritleri kullanma şeklimizdir, insan kök hücreleri bireyselleşir ve çoğu ölür ya da sadece farklılaşır ya da efsaneye bağlanmaz. Yani fikir şu ki, hücreleri kümeler halinde tutmanız gerekiyor. Onların içeride, şişede yalnız kalmalarını istemezsiniz.

Bu yüzden kollajenaz kullanmanın avantajı, hücreleri bitki olarak tutmaktır. Şipsi kullanarak, sadece bu çok, çok sert g opsonizasyon sürecinden sağ çıkacak hücreleri seçersiniz. Yani bu hücreler genellikle çok yüksek oranda proliferatiftir.

Böylece, hücrelerinizi bu tripsin sürecine adapte edebilirsiniz. Sorun şu ki, farklı davranan hücreleriniz var, çok daha hızlı gidiyorlar. Ve risklerden biri, bu çok yüksek bölünme sürecinde bazı ticari anormallikler elde edebilmenizdir.

Yani diyorsunuz ki, izasyon çoğu proliferatif hücre için kültürde hücre seçimine neden olabilir. Sağ. Diğer hücrelerden daha aktif ve muhtemelen daha yüksek hayatta kalma oranları. Yani çoğalmadan sonra, temel olarak tripsin içinde çoğalmadan sonra kültür, birkaç geçişten sonra farklı bir kültür haline gelir, bu farklı özellikler.

Yani, tam olarak aynı olup olmadıklarını anlamak zor. Testi yaparsanız, olağan testi, diyelim ki OC dört, nano bir, 60 SC, dört C, C3 gibi uç farklılaşmış hücrelerin işaretleyicilerini, düzenli belirteçlerini kontrol edersiniz, tüm bu molekül hala ifade edilebilir. TER oluşumu yaparsanız, bu hücreler yine de farklılaşabilir ve normal hücreler gibi oluşabilir.

Karyotipe bakarsanız, bazı anormallikleriniz olabilir, ancak yine de normal bir karyotipiniz olabilir. Seçici avantaj, bir karyotip yaparak göremediğiniz bir mutasyondan kaynaklanıyor olabilir. Bu yüzden çok daha hızlı büyümeleri kendi başına biraz daha kötü olduğunu düşünüyorum.

Ve eğer bu hücreleri bir noktada nakil için kullanmak istersek, kesinlikle bu tür hücreleri kullanmazdım. Tamam. Öyleyse, hücrelerin geçişleri için bu tekniği kullanmanın temel teknik sorunlarının neler olduğunu söylemek ister misiniz? Yani S kullanarak, evet.

Sadece biraz daha uzun ve aynı zamanda, hücreler o kadar hızlı gitmediği için, bazı deneyler yapmak için çok sayıda hücre elde etmek çok daha uzun. Bu yüzden daha az uygun olduğunu söyleyebilirim. Deneyinizin hedefleri hakkında birkaç kelimeden bahsetmek ister misiniz?

CS hücrelerini nasıl kullanıyorsunuz? Tamam, buradaki ana projem insan AB kök hücrelerinden endotel hücreleri elde etmek. Ve fikir kan yapabilmek.

Ve doku biyomühendisliği laboratuvarlarıyla çok çalışıyoruz ve hedeflerinden biri de in vitro doku yapmak. Ancak bunun sınırlamalarından biri, bu dokulardan geçen kan damarlarının olmamasıdır. Eğer endotel hücrelerini getirebilirsek veya bu dokuya endotel hücreleri koyabilirsek, bu dokuda daha iyi bir büyüme elde edebiliriz.

Bu nedenle, soğuk kan veya basınçlı kan gibi endotel hücreleri için çok az hücre kaynağı bilinmektedir, ancak insan yılları gibi başka bir hücre kaynağına sahip olmak ilginç olurdu. Ve bunun avantajı, insan yıllarının genişletilebilmesidir ve en sonsuzca, bu hücreleri değiştirebilir, bazı indüklenebilir sistemler yapabilir ve onu kullanabilirsiniz. Sonra nihai ürününüzde, bu durumda malzeme hücrelerinizde.