È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Capitoli
- 00:10Introduction
- 00:42Expression and Purification of Target Protein and Tagged Ubiquitin
- 03:15Immunoprecipitation
- 04:51SDS-PAGE and Immunostaining
- 05:48Detection of Protein Ubiquitination in vitro
- 07:02Representative Results
- 08:22Conclusion
Убиквитинирования является ключевым посттрансляционной модификации осуществляется набор из трех ферментов. Мутации генов, участвующих в этой модификации, связанные с различными заболеваниями человека. Здесь мы описываем протоколов для обнаружения белка убиквитинирования в культуре клеток<em> В естественных условиях</em> И пробирки<em> В пробирке</em>.
Tags
Protein UbiquitinationPosttranslational ModificationUbiquitin-activating Enzyme E1Ubiquitin-conjugating Enzyme E2Ubiquitin Ligase E3Deubiquitylating EnzymesProtein StabilityCellular LocalizationBiological ActivityGene MutationsHuman DiseasesCancerNeurodegenerationMetabolic DisordersPathogenesisDetection ProtocolsCultured Cells In VivoTest Tubes In VitroSumolyationNeddylation
