Name: Wolbachia infezione batterica in Drosophila (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-02-25T00:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 46 s
Description: Impara a isolare e iniettare Wolbachia in Drosophila melanogaster con un protocollo semplice e riproducibile. Questo metodo facilita lo studio della trasmissione batterica e delle dinamiche di infezione negli insetti.

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Gli autori non hanno nulla da dichiarare.

wolbachia infezione batterica in drosophila

Wolbachia Bacterial Infection in Drosophila

Wolbachia infezione batterica in Drosophila

Il mio nome è Voia Friedman. Sono ricercatrice associata presso l'Università di Princeton. Oggi vi illustrerò alcuni protocolli che ho sviluppato per trasmettere l'infezione, inizialmente per isolare, per tornare indietro dall'addome di moscerini infetti, e successivamente per aiutare ad iniettare il ceppo infetto in moscerini non colpiti.Quindi, in pratica, questo è un protocollo molto semplice per isolare lui oly per le basi. E utilizzerai questo dispositivo di, di mepo che contiene un filtro che va sopra un E. Quindi, fondamentalmente, devi mettere te, partiamo da circa cento moscerini. Anestetizzi i moscerini, li inserisci nel dispositivo con filtro, puoi semplicemente usare un imbuto e questo si adatterà molto facilmente a questo dispositivo e lo laverai con etanolo al 70%.Prendete semplicemente il pellet, eliminate il futuro, potete scartare l'etanolo, quindi dopo la terza lavata eseguite l'ultimo lavaggio con acqua molecolare perché non volete avere batteri con tracce di etanolo. Bene, poi passate semplicemente a una nuova provetta e centrifugate in un microcentrifugo, un vero microcentrifugo, per due minuti. Successivamente, potete procedere con l'iniezione. Si nutrono solo

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Parassitoide (parassita) vespe costituiscono una classe importante di nemici naturali di insetti tra...

An Introduction to vespe parassite di<em&gt; Drosophila</em&gt; E la risposta immunitaria antiparassitari

Fonte: Siva-Jothy, J. A., et al. Infezione batterica orale e caduta in Drosophila melanogaster. J. Vis. Esp. (2018)Il video mostra l'infezione orale di Drosophila melanogaster con batteri patogeni. Include la preparazione di fiale infettive e il trasferimento di mosche affamate per consentire l'ingestione batterica. La procedura cattura la colonizzazione intestinale, seguita dalla sterilizzazione superficiale e dall'omogeneizzazione delle mosche. Infine, mostra la quantificazione del carico...

Infezione orale di Drosophila melanogaster con batteri patogeni

Fonte: Hiroyasu, A., D et al., Estrazione di emociti dalle larve di Drosophila melanogaster per infezioni e analisi microbiche. J. Vis. Esp. (2018)Questo video mostra la procedura per stabilire un'infezione batterica nelle larve di Drosophila inserendole in una goccia batterica e pungendola con un ago di tungsteno. Le larve vengono poi incubate su una piastra agar scanalata e ricca di nutrienti per studiare le interazioni ospite-patogeno.

Stabilimento dell'infezione batterica nelle larve di Drosophila

Drosophila melanogaster è un eccezionale organismo modello per lo studio del sistema immunitario innato e delle conseguenze fisiologiche di infezioni e malattie. Questo protocollo descrive come somministrare infezioni batteriche robuste e quantitativamente ripetibili a D. melanogaster e come misurare successivamente la gravità dell'infezione e quantificare la risposta immunitaria dell'ospite.

Sistemica infezione batterica e immunitario Difesa fenotipi in<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Un metodo per l'allevamento di Drosophila melanogaster in condizioni axeniche e gnotobiotic è presentato. Fly embrioni vengono dechorionated in ipoclorito di sodio, trasferiti asetticamente alla dieta sterili, e allevati in contenitori chiusi. Inoculando dieta ed embrioni con i batteri porta ad associazioni gnotobiotic, e la presenza di batteri è confermata dalla placcatura di tutto il corpo omogenati Drosophila.

Allevamento la mosca della frutta<em&gt; Drosophila melanogaster</em&gt; Sotto axeniche e Gnotobiotic Condizioni

Le zanzare Aedes aegypti infettate con Wolbachia vengono rilasciate in popolazioni naturali di sopprimere la trasmissione dell'arbovirus. Descriviamo i metodi retro Ae. aegypti con Wolbachia infezioni in laboratorio per esperimenti e rilascio di campo, prendendo precauzioni per ridurre al minimo la selezione e l'adattamento di laboratorio.

Mantenimento di Aedes aegypti zanzare infettate con Wolbachia

Questo protocollo descrive metodi per esporre oralmente e di infettare il moscerino della frutta Drosophila melanogaster con batteri patogeni e per misurare il numero di batteri infettivi capannone dopo l'infezione dell'intestino. Descriviamo ulteriormente l'effetto di mutanti immuni sulla sopravvivenza vola dopo l'infezione batterica orale.

Infezione batterica orale e spargimento in Drosophila melanogaster

Questo protocollo viene descritto come stabilire l'infezione virale in vivo in Drosophila melanogaster utilizzando il metodo di nano-iniezione e tecniche di base per analizzare l'interazione virus-ospite.

Istituzione dell'infezione virale e analisi dell'interazione ospite-Virus in Drosophila Melanogaster

Le mosche adulte Drosophila melanogaster sono state ampiamente utilizzate come organismi modello per studiare i meccanismi molecolari alla base delle risposte immunitarie innate antimicrobiche dell'ospite e delle strategie di infezione microbica. Per promuovere lo stadio larvale di D. melanogaster come sistema modello aggiuntivo o alternativo, viene descritta una tecnica di iniezione larvale.

Drosophila melanogaster Protocollo di iniezione della larva

Sono stati utilizzati quattro metodi per rilevare Wolbachia intracellulare, che si sono completati a vicenda e hanno migliorato l'accuratezza del rilevamento dell'infezione da Wolbachia di Aa23 derivato da Aedes albopictus e Aa23-T curato dall'infezione nativa di Wolbachia utilizzando antibiotici.

Rilevamento del ceppo Wolbachia wAlbB nelle linee cellulari Aedes albopictus

Le linee cellulari sono utili negli studi su organismi intracellulari che non possono essere coltivati al di fuori delle loro cellule ospiti. Sebbene le linee infettate da Wolbachia abbiano permesso molte scoperte, l'eterogeneità all'interno di queste linee può portare a risultati sperimentali variabili. Presentiamo un protocollo per la generazione di cloni di singole cellule e colture continue da cellule JW18 infettate da Wolbachia.

Generazione di colture monoclonali da linea cellulare JW18 di Drosophila melanogaster infettata da Wolbachia

Impara a isolare e iniettare Wolbachia in Drosophila melanogaster con un protocollo semplice e riproducibile. Questo metodo facilita lo studio della trasmissione batterica e delle dinamiche di infezione negli insetti.

Wolbachia infezione batterica in Drosophila

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