È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Capitoli
- 00:00Titolo
- 00:56Introduction
- 01:20Cell Culture and Solution Preparation
- 03:37Biotinylation, Quenching and Internalization of Proteins
- 07:30Protein Assay, Affinity Chromatography and SDS-Page Analysis of Proteins
- 09:49Dopamine Transporter Internalization
- 11:02Conclusion
Gereglementeerde endocytose regelt de cel oppervlakte-expressie niveaus van de meerderheid van de membraaneiwitten. Hier maken wij gebruik van herleidbaar, membraan impermeant biotinylatie reagentia aan de endocytische koers van de dopamine transporter (DAT), een membraaneiwit polytopic te meten. De methode maakt een directe benadering van het meten van de endocytische snelheid van de meeste plasma-membraan eiwitten.
