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Split-ubiquitine membrane à base de levure double hybride (MYTH) Système: Un outil puissant pour identifier les interactions entre protéines
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Split-Ubiquitin Based Membrane Yeast Two-Hybrid (MYTH) System: A Powerful Tool For Identifying Protein-Protein Interactions
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Split-ubiquitine membrane à base de levure double hybride (MYTH) Système: Un outil puissant pour identifier les interactions entre protéines

DOI:
10.3791/1698-v

•

14:04 min

•

February 01, 2010

•

, , ,
1Department of Biochemistry,University of Toronto, 2Department of Molecular Genetics,University of Toronto, 3Terrence Donnelly Centre for Cellular and Biomolecular Research (CCBR),University of Toronto

Capitoli

  • 00:00Titolo
  • 01:22Introduction
  • 01:41Selection of Bait and Appropriate MYTH System
  • 03:04Generation of tMYTH Baits by Gap Repair
  • 03:07a. Vector Preparation and Amplification of Gene of Interest
  • 05:30b. Yeast Transformation and Recovery of Bait Plasmid DNA
  • 07:03Bait Validation
  • 08:10MYTH Screening
  • 08:12a. Large Scale Yeast Transformation
  • 11:31b. Bait Dependency Test
  • 12:54Representative Results/ Outcome
  • 13:12Conclusion

Summary

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MYTHE permet la détection sensible des interactions transitoires et stables entre les protéines qui sont exprimées dans l'organisme modèle Saccharomyces cerevisiae. Elle a été appliquée avec succès pour étudier exogènes et de la levure des protéines membranaires intégrales en vue d'identifier leurs partenaires d'interaction de façon à haut débit.

Tags

Split-ubiquitinMembrane Yeast Two-hybridProtein-protein InteractionsMYTH SystemFull-length Transmembrane ProteinsSaccharomyces CerevisiaeBait ProteinPrey ProteinsUbiquitin MoietiesArtificial Transcription FactorPseudo-ubiquitin MoleculeDeubiquitinating EnzymesReporter Gene Expression

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