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कैनेटीक्स और संरचना समारोह विश्लेषण में आत्मीयता निर्धारण के लिए सही प्रोटीन एकाग्रता का महत्व
JoVE Journal
Biologia
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JoVE Journal Biologia
The Importance of Correct Protein Concentration for Kinetics and Affinity Determination in Structure-function Analysis
DOI:

19:16 min

March 17, 2010

Capitoli

  • 00:00Titolo
  • 01:38Introduction
  • 02:30Experimental Design
  • 03:58Immobilization of the Ligand Papain for CFCA Analysis
  • 07:34Determining Cystatin B Concentration Using the CFCA Assay
  • 11:07Measuring the Kinetics of Cystatin B binding to Papain
  • 17:13CFCA assay and Kinetics of Cystatin B binding to Papain Representative Results
  • 18:47Conclusion

Summary

Traduzione automatica

हम लागू लेबल मुक्त प्रोटीन बातचीत विश्लेषण का उपयोग कई cystatin बी म्यूटेंट के लिए बाध्य गतिज लक्षण वर्णन के माध्यम से papain का विश्लेषण संरचना समारोह के लिए Biacore X100. अंशांकन मुक्त एकाग्रता विश्लेषण (CFCA) बनाए रखा बाध्यकारी गतिविधि के साथ एक मानक वक्र के लिए आवश्यकता के बिना प्रोटीन की एकाग्रता के उपाय. हम सांद्रता की कि पुष्टिकरण का उपयोग CFCA गतिज विश्लेषण की विश्वसनीयता बढ़ जाती है और कि गतिज स्थिरांक मज़बूती से निर्धारित किया है भले ही एक पुनः संयोजक प्रोटीन की गतिविधि कम है किया जा सकता है दिखाते हैं.

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