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使用内源性野生型BRCA1基因的细胞表达,确定同源重组的BRCA1基因突变的影响
JoVE Journal
Biologia
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Biologia
Identifying the Effects of BRCA1 Mutations on Homologous Recombination using Cells that Express Endogenous Wild-type BRCA1
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Click here for the English version.
使用内源性野生型BRCA1基因的细胞表达,确定同源重组的BRCA1基因突变的影响
DOI:
10.3791/2468-v
•
08:53 min
•
February 17, 2011
•
Jeffrey Parvin
,
Natsuko Chiba
,
Derek Ransburgh
1
Department of Biomedical Informatics
,
The Ohio State University
,
2
Departments of Molecular Immunology and Clinical Oncology
,
Tohoku University
Capitoli
00:05
Titolo
02:01
Preparation of Cell Line with an Integrated Recombination Substrate
03:04
Transfection to Deplete Endogenous BRCA1 and add back Mutant BRCA1
05:19
Analysis of Transfectants
06:07
Analysis of the Effects of BRCA1 Mutations on Homologous Recombination via GFP-Expression
07:54
Conclusion
Summary
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Traduzione automatica
我们提供了一个用于测试在一个组织文化同源重组修复DNA损伤的检测消耗使用RNA干扰细胞内源性BRCA1蛋白和替换它与BRCA1基因点突变,其中包含一个编码变化的BRCA1基因变体的方法。
Tags
BRCA1 Mutations
Homologous Recombination
Endogenous BRCA1
Missense Mutations
Functional Analysis
Cell Lines
RNAi Targeting
BRCA1 MRNA
BRCA1 Variant
Acute Silencing
Secondary Mutations
Compensation For Loss Of Function
HeLa-derived Cell Line
Homologous Recombination Assay
Recombination Substrate
I-SceI Restriction Enzyme Site
GFP Allele
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