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Capitoli
- 00:05Titolo
- 02:01Preparation of Cell Line with an Integrated Recombination Substrate
- 03:04Transfection to Deplete Endogenous BRCA1 and add back Mutant BRCA1
- 05:19Analysis of Transfectants
- 06:07Analysis of the Effects of BRCA1 Mutations on Homologous Recombination via GFP-Expression
- 07:54Conclusion
Ofrecemos un método para probar variantes de BRCA1 en un ensayo de cultivo de tejidos para la reparación basada en la recombinación homóloga de ADN dañado por el agotamiento de la proteína BRCA1 endógena a partir de una célula utilizando ARN de interferencia y su sustitución por un mutante BRCA1 punto que contiene un cambio de codificación.
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BRCA1 MutationsHomologous RecombinationEndogenous BRCA1Missense MutationsFunctional AnalysisCell LinesRNAi TargetingBRCA1 MRNABRCA1 VariantAcute SilencingSecondary MutationsCompensation For Loss Of FunctionHeLa-derived Cell LineHomologous Recombination AssayRecombination SubstrateI-SceI Restriction Enzyme SiteGFP Allele
