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Isolement des ribosomes Traduire Contenant Peptidyl-ARNt pour des analyses fonctionnelles et structurelles
JoVE Journal
Biologia
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JoVE Journal Biologia
Isolation of Translating Ribosomes Containing Peptidyl-tRNAs for Functional and Structural Analyses
DOI:

11:19 min

February 25, 2011

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Capitoli

  • 00:05Titolo
  • 02:59Preparation of Cell Free Extracts Depleted of RF2
  • 04:28Preparation of a DNA Template
  • 05:18Preparation of Biotin Labeled mRNA
  • 06:19Isolation of Translating Ribosomes Containing a Peptidyl-tRNA
  • 07:56Analysis of the Isolated Ribosomes Containing the Peptidyl-tRNA
  • 09:23Representative Results
  • 10:52Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Un obstacle majeur à des analyses biochimiques des ribosomes contenant naissante peptidyl-ARNt a été la présence de ribosomes d'autres dans les mêmes échantillons, les ribosomes pas impliqué dans la traduction de la séquence d'ARNm spécifiques en cours d'analyse. Nous avons développé une méthodologie simple pour purifier, en exclusivité, les ribosomes contenant la naissante peptidyl-ARNt d'intérêt.

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