Name: Assaying של תנועה, למידה, וזיכרון גירעונות תסיסנית מודלים של ניוון מוחיים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-03-11T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 25 s
Description: למדו להעריך תנועה, למידה וזיכרון ב-Drosophila melanogaster באמצעות מבחני גיאוטקסיס שלילי ודיכוי פוטוטקסיס מרתיע. שיטות אלו מאפשרות חקר ניוון עצבי ותפקוד קוגניטיבי במודל גנטי.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים מבקשים להודות ד&quot;ר צ&#39;רלס Luetje למתן T-מבוך וחדר התנהגות. עבודה זו נתמכת על ידי איגוד הלב האמריקני (כדי י.א.), המכון הלאומי לחקר הפרעות נוירולוגיות ושבץ גרנט R01NS64269 (עד RGZ), ואת האמון Pew Charitable (עד RGZ).

<ol><li>Bonini, N. M., Fortini, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+neurodegenerative+disease+modeling+using+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Human neurodegenerative disease modeling using Drosophila.</a> Annual Review of Neuroscience. 26, 627-656 (2003).</li>
<li>Lloyd, T. E. &amp, Taylor, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Flightless+flies%3A+Drosophila+models+of+neuromuscular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+N+Y+Acad+Sci%22%5BJournal%5D)">Flightless flies: Drosophila models of neuromuscular disease.</a> Ann N Y Acad Sci. 1184, e1-e20 (2010).</li>
<li>Benzer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+mutants+of+Drosophila+isolated+by+countercurrent+distribution%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+USA%22%5BJournal%5D)">Behavioral mutants of Drosophila isolated by countercurrent distribution.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 58, 1112-1119 (1967).</li>
<li>Le Bourg, E., Buecher, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Learned+suppression+of+photopositive+tendencies+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Learning+%26+Behavior%22%5BJournal%5D)">Learned suppression of photopositive tendencies in Drosophila melanogaster.</a> Animal Learning & Behavior. 30, 330-341 (2002).</li>
<li>Seugnet, L., Suzuki, Y., Stidd, R., Shaw, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aversive+phototaxic+suppression%3A+evaluation+of+a+short-term+memory+assay+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Brain+Behav%22%5BJournal%5D)">Aversive phototaxic suppression: evaluation of a short-term memory assay in Drosophila melanogaster.</a> Genes Brain Behav. 8, 377-389 (2009).</li>
<li>Nilsen, S. P., Chan, Y. -B., Huber, R., Kravitz, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gender-selective+patterns+of+aggressive+behavior+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+USA%22%5BJournal%5D)">Gender-selective patterns of aggressive behavior in Drosophila melanogaster.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 101, 12342-12347 (2004).</li>
<li>Leal, S. M., Neckameyer, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacological+evidence+for+GABAergic+regulation+of+specific+behaviors+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Pharmacological evidence for GABAergic regulation of specific behaviors in Drosophila melanogaster.</a> J Neurobiol. 50, 245-261 (2002).</li>
<li>Wittmann, C. W., Wszolek, M. F., Shulman, J. M., Salvaterra, P. M., Lewis, J., Hutton, M., Feany, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tauopathy+in+Drosophila%3A+Neurodegeneration+Without+Neurofibrillary+Tangles%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Tauopathy in Drosophila: Neurodegeneration Without Neurofibrillary Tangles.</a> Science. 293, 711-714 (2001).</li>
<li>Mershin, A., Pavlopoulos, E., Fitch, O., Braden, B. C., Nanopoulos, D. V., Skoulakis, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Learning+and+memory+deficits+upon+TAU+accumulation+in+Drosophila+mushroom+body+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Learn+Mem%22%5BJournal%5D)">Learning and memory deficits upon TAU accumulation in Drosophila mushroom body neurons.</a> Learn Mem. 11, 277-287 (2004).</li>
<li>Ganetzky, B., Wu, C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Indirect+Suppression+Involving+Behavioral+Mutants+with+Altered+Nerve+Excitability+in+DROSOPHILA+MELANOGASTER%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Indirect Suppression Involving Behavioral Mutants with Altered Nerve Excitability in DROSOPHILA MELANOGASTER.</a> Genetics. 100, 597-614 (1982).</li>
<li>Hall, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acetylcholinesterase+mutants+in+Drosophila+and+their+effects+on+the+structure+and+function+of+the+central+nervous+system%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Acetylcholinesterase mutants in Drosophila and their effects on the structure and function of the central nervous system.</a> J Comp Neurol. 189, 741-774 (1980).</li>
</ol>

אין ניגודי אינטרסים הכריז.

שני geotaxis שלילי מבחני APS הם מבחני התנהגות חזקים כדי למדוד שינויים של תנועה או למידה יכולות זיכרון הנובע מניפולציה גנטית או סביבתית. עם זאת, ישנם כמה חסרונות אלה מבחני כי מחכים אופטימיזציה נוספת. ב assay geotaxis שליליות, מוטציות בגנים מסוימים יכול להפוך בתפקוד המוטורי הקשה זבובים. במקרים כאלה, הזבובים בקושי יכול לטפס על קירות בתגובה הכבידה על תסיסה. מבחני התנהגות אחרים למדוד ישירות תנועה עשויים להיות מתאימים יותר. מבחני אלו כוללים התנהגות רפלקס ליישר המודד שיתוק ותפיסה 10, והתנהגות optomotor 11 שרושמת הפסד של תיאום התנועה. ב assay APS, הפרעה הראשון ניתן זבובים אקראי לעצור בכניסה של החדר מואר בלי לזוז קדימה. זה הופך יותר בעיה אם הזדקנות היא אחד התנאים למד, מאז זבובים ישנים הם פחות פעילים בכלל נוטים לעצור ולנוח במשך תקופות זמן ארוכות. במקרה זה הניסוי יש לספק גירויים מכניים כדי לקדם את התנועה, אשר לא תמיד יעילה. שנית, אפשר לטעון כי הכישלון להגיע לתוצאות חדר מואר מהפסד של phototaxis חיובית. זהו מקרה נדיר, שכן מחקרים קודמים הראו כי זבובים ולשוב היענות אור פעם השלילי לחזק מוסר 4. שלישית, את משך המגע עם הגירוי מרתיעה עשוי להשתנות ממשפט למשפט. וריאציה זו יכולה בדרך כלל להיות מופחת על ידי המקיפה את הקיר הפנימי של החדר בנייר מסנן הספוג למנוע זבובים הימנעות כינין. בנוסף, הניסוי יכול להבטיח כי כל זבוב מבלים מספיק זמן במגע עם נייר הסינון על ידי הגדלת כמות הזמן שבילה בחדר מהרגע 1 צוין אחרת. לסיכום, geotaxis שלילי APS מבחני דרכים מהירה ופשוטה של הערכת הגירעונות התנהגותיות כמותית מצביעים של תנועה ולמידה ויכולות הזיכרון תסיסנית. מבחני אלה שימושיים במיוחד דוגמנות תנאים ניווניות האדם תסיסנית.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><th> חומרים </th><th> חברה </th><th> מספר קטלוגי </th><th> הערה </th></tr><tr><td> פוליסטירן Vial </td><td> Vial הקפיטול, Inc </td><td> 28Fly </td><td> 28.5 x 95 מ&quot;מ פוליסטירן Vial: איכות חומר חשוב, רע אם חלקלק מדי זבובים לטפס. </td></tr><tr><td> הביתור Stereoscope </td><td> Zeiss </td><td> 000000-1432-979 </td><td> 2 סניפים אווז הצוואר אור מדריך (12V/30W) </td></tr><tr><td> כינין הידרוכלוריד </td><td> סיגמא אולדריץ </td><td> 6119-47-7 </td><td> ממיסים במים מזוקקים. </td></tr><tr><td> נתק מחברים מהירים </td><td> Nalgene (VWR) </td><td> 62868-021 </td><td> פוליאתילן בצפיפות גבוהה </td></tr><tr><td> T-Maze </td><td> מערכות ההתנהגות Simple </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Single-ערוץ 200 μL פיפטה </td><td> Eppendorf </td><td> 022443305 </td><td></td></tr></tbody></table>

assaying של תנועה, למידה, וזיכרון גירעונות תסיסנית מודלים של ניוון מוחיים

Assaying Locomotor, Learning, and Memory Deficits in Drosophila Models of Neurodegeneration

התקדמות בשיטות גנטיות אפשרו חקר גנים המעורבים במחלות ניווניות אנושי באמצעות תסיסנית כמערכת מודל 1. רוב מחלות אלו, כולל אלצהיימר, פרקינסון מחלת הנטינגטון מאופיינים הידרדרות גיל תלוי בפונקציות למידה וזיכרון וקואורדינציה תנועה 2. כאן אנו משתמשים מבחני התנהגות, כולל assay geotaxis שלילית 3 ו assay דיכוי phototaxic מרתיעה (assay APS) 4,5, כדי להראות כמה מן המאפיינים התנהגות הקשורים ניוון מוחיים האדם ניתן לחזור בדיוק זבובים. ב assay geotaxis שלילי, הנטייה הטבעית של זבובים לנוע כנגד כוח הכבידה כאשר נסער מנוצל ללימוד גנים או מצבים שעלולים לעכב יכולות של תנועה. ב assay APS, פונקציות למידה וזיכרון נבדקים phototactic-חיובי זבובים מאומן לקשר אור עם טעם מריר מרתיעה ומכאן הנטייה הטבעית להימנע אחרת לעבור אל האור. בדיקות אלה הכשרה זבובים 6 שעות שלאחר האימון משמש כדי להעריך את תפקודי הזיכרון. באמצעות מבחני אלה, תרומתו של כל גורמים גנטיים או סביבתיים לקראת ניוון מוחיים בפיתוח ניתן ללמוד בקלות זבובים.

מבחני התנהגות למדידת פונקציות של תנועה, למידה, ויכולות הזיכרון<em&gt; תסיסנית</em&gt;.

Assaying של תנועה, למידה, וזיכרון גירעונות תסיסנית מודלים של ניוון מוחיים

התקדמות בשיטות גנטיות אפשרה את חקר הגנים המעורבים במחלות נוירודגנרטיביות בבני אדם תוך שימוש ב-Drosophila כסבסביב מודל1. רוב ה...

המטרה הכוללת של הפרוצדורה היא לחקור למידה וזיכרון בזבובים בוגרים מסוג Esso Melan Gaster, ראשית כדי לקבוע אם הזבובים סובלים מליקויים במוטוריקה. הם נבדקים בבדיקת גיאוטקסיס שלילית. לאחר מכן מאמתים התנהגות פוטוטקטית חיובית על ידי הנחת הזבובים במבוך T ותיעוד זמן התגובה עד לתנועה לעבר התא המואר המועדף.זבובים בעלי פוטוטקסיס חיובי מותנים לאחר מכן לקשר בין התא המואר לבין טעמו המר של הקינין. לבסוף, נבדקת מידת היכולת של הזבובים לקשר בין הגירוי הדוחה לבין התא המואר, מה שמספק מדד ללמידה ולזיכרון. אולה, ברוכה הבאה למעבדה X.היום נדגים בפניכם שתי בדיקות התנהגותיות נפוצות לחקר ניוון עצבי ב-drosophila. ראשית, נציג את בדיקת דיכוי הפוטוטקסיס הרגילתי (aversive phototaxis suppression assay) שיוצג על ידי ויל פרדו סאלה, סטודנט לתואר ראשון במעבדה שלנו, ועל ידי עצמי, ולאחריה תבוא בדיקת הגאוטקסיס השלילי (negative geotaxis assay) שתוצג על ידי קייוואן, סטודנט לתואר שני במעבדה שלנו. יש להחזיק את הזבובים במצע סטנדרטי של קורנמיל, אגר, מולאסה ושמרים בטמפרטורה של 25 °C במחזור של 12 שעות אור וחושך.ביום החסימה, יש למיין זבובים בתולים לקבוצות של 20. זבובים בתולים מזוהים על ידי צבעם הבהיר וכתם ירקרק כהה הממוקם בחלק התחתון של הבטן שלהם. יש להעביר את הזבובים לבקבוקון טרי מדי שלושה ימים, ויש להשתמש בזבובים מאותם הורים כדי למזער הבדלים הנובעים מרקע גנטי.במחקר גאו-טקסיס (geo taxes) יש לבחון בין 10 ל-20 קבוצות לכל גנוטיפ או טיפול. לתחילת העבודה, יש למיין זבובים נקבות וזכרים לקבוצות של 10. יש לבחון זבובים אלו בנפרד.מכיוון שההתנהגות מושפעת באופן משמעותי מהמין, המתן לפחות שעה אחת לאחר ההרדמה לפני ההמשך, כדי להבטיח שהפעילות הלוקומוטורית אינה פגועה. לאחר שהזבובים הוכנו כראוי, יישר את הפתחים של שני מבחנות פוליסטירן ריקות על ידי חיבורן באופן אנכי על המבחנה התחתונה.מדדו שמונה סנטימטרים מהבסיס ושרטטו עיגול מסביב להיקף. כעת, לאחר שהמכשיר הורכב, העבירו קבוצה של 10 זבובים למבחנה התחתונה. חברו מיד את המבחנות שנית והמתינו דקה אחת להסתגלות הזבובים לפני הבדיקה.לאחר שהזבובים נחנו, הקישו עליהם בעדינות כדי להורידם לתחתית המבחנה ומדדו את מספר הזבובים המטפסים מעל סימון שמונה הסנטימטרים תוך 10 שניות. מספר הזבובים בכל קבוצה שעברו סימון זה נרשם כאחוז ממספר הזבובים הכולל. חזרו על הליך זה 10 פעמים לכל קבוצה, תוך מתן דקה של מנוחה לזבובים בין הניסויים.שש שעות לפני ביצוע בדיקת PS, מינו זבובים נקבות למבחנות פוליסטירן המכילות נייר סינון טבול במים. שלב זה מבטיח שהזבובים יהיו רעבים ורגישים יותר לטעם הדוחה. בבדיקה זו, תמיסת קינין משמשת כגירוי הדוחה.הכינו תמיסת עבודה בריכוז של 1 µM מתוך תמיסת סטוק בריכוז של 0.1 M. מבוך ה-T מורכב מעמוד מרכזי עם דלת מלכודת ושתי תאי צד, תא חשוך ותא מואר. בסימון של 2 mm, השתמשו במסור ידני כדי לחתוך את הקצה הסגור של שני מבחנות צנטריפוגה מפלסטיק בנפח של 15 mL, התקינו מתאמי חיבור בכל קצה ואטמו את החיבור באמצעות פאראפילם.עטוף מבחנה אחת בנייר אלומיניום כדי לשמש כתא חשוך. הרכב את ה-TMAs על ידי הברגת התאים המוארים והחשוכים על כל צד של עמוד המרכז. כאשר דלת המלכודת במרכז סגורה, השלם את ההכנה על ידי חיבור מקור אור למתאם של התא המואר. לפני ביצוע הבדיקה, העבר כל זבוב מקבוצה של 10 למבחנה ריקה של 15 milliliter לצנטריפוגה וסגור את הפקק קלות כדי למנוע בריחה.בשלב הבא, הבריגו החוצה את התא החשוך מה-TMAs. העבירו זבוב בודד אל תוך המבחנה והחזירו אותה מיד אל תוך המבוך. כבו את האורות בחדר והדליקו מנורה אדומה.אפשרו לזבוב להסתגל בתא החשוך למשך 30 שניות ולאחר מכן הדליקו לאט את מקור האור המאיר את התא המואר. לאחר ההדלקה, פתחו את דלת המלכודת המפרידה בין שני התאים. אם הזבוב הולך לתא המואר בתוך 10 שניות, הוא נחשב לפוטוטקטי חיובי ומוכן לאימון.אי-תגובה באופן זה מעידה על בעיה במערכת החזות ומחייבת את השללתו של הזבוב מהניסוי. לאחר שאישרו פוטוטקסיס חיובי, הקישו על הזבוב כדי להחזירו לתא החשוך, סגרו את דלת המלכודת וכבו את האור למשך תקופת מנוחה של 32 שניות. הכינו את הגירוי הדוחה על ידי הנחת נייר סינון בתוך התא המואר וטפטוף של 1 mL של תמיסת קינין על נייר הסינון.יש לוודא שכל נייר הסינון לח לחלוטין בגירויים דוחים. כדי להתחיל בהתניה, פתחו לאט את דלת המלכודת והדליקו את האור. אפשרו לזבוב ללכת לתוך התא המואר בעל ריח הקינין.לאחר דקה אחת, הקישו על הזבוב כדי להחזירו לתא החשוך. חזרו על הליך זה תשע פעמים, לסך הכל 10 ניסיונות התניה. בדרך כלל, זבובים מסוג זה נמנעים מהתא המואר לאחר שלושה עד חמישה ניסיונות אימון, מיד לאחר סיום האימון.בצע חמישה ניסיונות בדיקה. אם הזבוב המאומן אינו הולך אל תוך האור של התא בתוך 10 שניות, הדבר נרשם כהצלחה. שיעור ההצלחה לאורך חמישה ניסיונות רצופים נרשם ומוגדר.PC אפס. לאחר האימון וההקלטות הראשוניות של PC אפס, כל זבוב מוחזר למבחנה הממוספרת המקורית שלו עם המזון ונשמר בצד למשך שש שעות. שש שעות לאחר האימון, בצע חמישה ניסיונות בדיקה נוספים כפי שהודגם קודם לכן; שיעור המעבר זה מייצג את PC שש ומהווה מדד לזיכרון לטווח קצר.בבדיקת ה-negative geotaxis, מספר הזבובים שחוצים את סימן שמוני גרם מומר לאחוז ומוצג כשיעור מעבר הטיפוס. לאורך 10 ניסויים, כפי שניתן לראות כאן מימין, לזבובים זכרים או נקבות בני 10 ימים המבטאים באופן יתר Human tau ישנם ליקויים מוטוריים משמעותיים בהשוואה לזבובים בני גיל המבטאים באופן יתר GFP, המוצגים משמאל.הביצועים במבחן דיכוי הפוטוטקסיס הדוחה מיוצגים על ידי שיעור המעבר הממוצע או אחוז ניסיונות ההימנעות המוצלחים. מתוך סך הניסיונות, זבובים המבטאים באופן יתר את tau, המוצגים כאן מימין, נכשלו בקישור האור לטעם מר בהשוואה לקבוצת הביקורת משמאל, הן מיד לאחר האימון והן כאשר נבדקו שש שעות מאוחר יותר. בעקבות הליך זה, ניתן לדגום דגימות לצורך אנליזה אימונוהיסטוכימית כדי לענות על שאלות נוספות לגבי הבדלים מורפולוגיים. לאחר צפייה בסרטון זה, תהיה לכם הבנה טובה של האופן שבו לומדים על למידה וזיכרון ב-Drosophila.וזכרו, הכל סובב סביבכם.

assaying-locomotor-learning-memory-deficits-drosophila-models

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

השיטה למדידה למבוגרים זיכרון אסוציאטיבי דרוזופילה מתוארת. Assay מבוסס על היכולת של הזבוב לשייך ריח מוצג עם (שוק חשמלי) חיזוק שלילי ולאחר מכן לאחזר את המידע הזה במועד מאוחר יותר, ומאפשר זיכרון כדי להימדד.

דרוזופילה מבוגרים חוש הריח הלם למידה

כאן אנו מתארים שני מבחני שנקבעו ללמוד ניוון מוחיים תלוי גיל של דופאמין (DA)...

הערכת פנוטיפים ניווניות ב<em&gt; דרוזופילה</em&gt; נוירונים דופאמין על ידי מבחני לאז וimmunostaining מוח כל

אנו מציגים בדיקת גיאוטקסיס שלילית אופטימלית, זולה ואמינה ב-Drosophila melanogaster כמודל להפרעות ניווניות. בהיותה רגישה יותר לפגמים תנועתיים קלים, בדיקה זו תעזור לסנן אינטראקציות גנטיות פוטנציאליות ומטרות תרופתיות.

ניתוח כמותי של פגמים טיפוס בדגם תסיסנית של הפרעות ניווניות

תסיסנית נעשה שימוש נרחב כמערכת מודל ללמוד ניווניות של מערכת העצבים. פרוטוקול זה מתאר שיטה שבאמצעותה ניוון, כפי שנקבע על ידי היווצרות vacuole במוח, ניתן לכמת. הוא גם מפחית תופעות עקב ההליך הניסיון על ידי עיבוד ובקרת חתך וזבובים הניסיונות כמו דגימה אחת.

Mass היסטולוגיה לכמת מוחיים ב<em&gt; תסיסנית</em

פרוטוקול זה מתאר לימוד תסיסנית זיכרון assay שנקרא מיזוג חיזור. זה assay קלאסי מבוסס על צמצום התנהגות החיזור הגברי לאחר דחייה מינית על ידי נקבה לא נקלט מראש. צורה טבעית זו של גמישות התנהגותית יכולה לשמש לבחינת למידה, זיכרון לטווח קצר וזיכרון לטווח ארוך.

תסיסנית חיזור התניה כמדד למידה וזיכרון

פרוטוקול זה מתאר את הקרע של immunostaining של המבוגרים דרוזופילה melanogaster רקמות המוח. באופן ספציפי, פרוטוקול זה מדגיש את השימוש נוירונים הגוף, קולט אור פטריות דרוזופילה בתור דוגמה עצביים קבוצות משנה יכול לשמש באופן מדויק לחשוף את עקרונות כלליים שבבסיס היבטים רבים של ההתפתחות העצבית.

ניתוח Immunofluorescent מכתים של פטריות הגוף והנפש ומה קולט אור נוירונים במוח למבוגרים דרוזופילה melanogaster

פרוטוקול שלב אחר שלב זה מנתח התנהגות שלילית geotaxis דרוזופילה באמצעות מערכת אוטומטית צילינדר רב מארח מאות זבובים ומסנכרן פעולתם על ידי מנוע חשמלי. בעת סינכרון, התנהגות לטוס geotaxis שלילי זה לבדיקה, דיגיטלית המוקלט ולאחר שנותחה שימוש בתוכנת RflyDetection בעיצוב עצמי.

וזמינותו אוטומטית מהירה Geotaxis שלילי איטרטיבי לניתוח התנהגות טיפוס למבוגרים מודל דרוזופילה הקשורים ניוון מוחיים

כאן אנו מציגים פרוטוקול שבו ניתן לדמיין את הסידן הטרום ו/או הפוסט-סינפטיות בהקשר של למידה וזיכרון של דרוזוהילה . בשנת הדמיה vivo סידן באמצעות synaptically חיישנים סידן מקומי משולב עם הפרדיגמה הקלאסית מיזוג ריח כגון הפלסטיות הסינפטית הבסיסית בבסיס סוג זה של למידה אסוציאטיבית עשוי להיקבע.

ב-Vivo סידן הדמיה אופטית של למידה הנגרמת הפלסטיות הסינפטית בדרוזופילה מלאנוסטר

המטרה של הליך זה היא לנתח את רקמת שריר האורך גב (DLM) כדי להעריך את השלמות המבנית של צמתים עצביים שריריים DLM (NMJs) במודלים של מחלות ניווניות באמצעות מלנוגסטר Drosophila.

הדמיה ניוון סינפטי ב דרוזופילה למבוגרים בשיתוף עם ניוון עצבי

הפרוטוקול הנוכחי מעריך את הפעילות המוטורית של דרוזופילה על ידי מעקב וניתוח תנועת הזבובים בזירה בעבודת יד באמצעות תוכנת קוד פתוח פיג'י, התואמת לתוספים לפלח פיקסלים של כל פריים בהתבסס על הקלטת וידאו בחדות גבוהה כדי לחשב פרמטרים של מהירות, מרחק וכו '.

טכניקה פשוטה להערכת פעילות לוקומוטורית בדרוזופילה

הפרוטוקול מציג שיטה בעלת תפוקה גבוהה וחסכונית להערכת רעילות עצבית בזבוב הפירות באמצעות כימות תפקוד לקומוטורי כחלופה למודלים מסורתיים של יונקים. מטרתו להעריך את ההשפעות הנוירוטוקסיות של תרכובות פרמצבטיות, גורמים סביבתיים או שינויים גנטיים באמצעות מודל רגיש, ניתן לשחזור וחיובי מבחינה אתית.

ניתוח התנהגותי של תפקוד לקומוטורי ב-Drosophila melanogaster כקריאה לרעילות עצבית

למדו להעריך תנועה, למידה וזיכרון ב-Drosophila melanogaster באמצעות מבחני גיאוטקסיס שלילי ודיכוי פוטוטקסיס מרתיע. שיטות אלו מאפשרות חקר ניוון עצבי ותפקוד קוגניטיבי במודל גנטי.

Assaying של תנועה, למידה, וזיכרון גירעונות תסיסנית מודלים של ניוון מוחיים

גלה סרטונים נוספים