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Haute profilage de microARN Débit: Multiplex Optimisé qRT-PCR à l'échelle nanolitres sur l'IFC de Fluidigm ArrayTM dynamique
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1The Eli and Edythe Broad Center of Regeneration Medicine and Stem Cell Research,University of California San Francisco , 2Center for Reproductive Sciences,University of California San Francisco , 3Department of Urology,University of California San Francisco , 4Department of Cell and Tissue Biology,University of California San Francisco , 5Fluidigm Corporation,Fluidigm Corporation , 6Department of Obstetrics and Gynecology,Hadassah-Hebrew University Medical Center, 7UCSF – Helen Diller Family Comprehensive Cancer Center,University of California San Francisco
Capitoli
- 00:05Titolo
- 00:55RNA Concentration
- 02:03Gel Purification of pre-PCR Product
- 03:46Preparing the 96.96 Dynamic Array IFC, the Samples, and the 13x Assays
- 05:25qRT-PCR Analysis of miRNA Expression in Mouse ESC and Human Serum
- 06:10qRT-PCR Analysis
- 07:04Conclusion
Nous décrivons ici une inversion optimisé multiplexe transcriptase PCR quantitative (qRT-PCR) en combinaison avec le protocole d'une plateforme microfluidique comme un coût et le temps moyen efficace de dépistage à haut débit pour microARN (miARN) les niveaux d'expression, surtout quand on travaille avec des quantités limitées de l'échantillon.
Tags
High Throughput MicroRNA ProfilingMultiplex QRT-PCRFluidigm Dynamic ArrayTM IFCsMiRNAsQuantificationMicroRNA LevelsWild-typeSmall RNA Deficient Mouse Embryonic Stem Cells (mESC)AccuracyRobustnessOptimized MethodPurifying PrimersSingleplex Real-time DetectionMicrofluidic ChipNanoliter VolumesReagent CostsHigh Throughput MiRNA Expression Profiling
