È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Capitoli
- 00:05Titolo
- 01:11Principle of the Random Conical Tilt Method
- 02:10Preparation of Holey Carbon Grids Covered with Thin Carbon
- 05:08Negative Staining of the Exosome Complex
- 06:23Electron Microscopy of the Exosome Complex
- 08:10Image Processing of the Data
- 10:55Representative Results for Single Particle Electron Microscopy Reconstruction of the Exosome Complex Using the Random Conical Tilt Method
- 11:29Conclusion
Denna artikel beskriver en standardiserad metod för att få en tredimensionell (3D) rekonstruktion av biologiska makromolekyler med hjälp av negativ mikroskopi färgning elektron (EM). I detta protokoll förklarar vi hur du får 3D-strukturen för Saccharomyces cerevisiae exosome komplex på medelhög upplösning med hjälp av slumpmässiga koniska metoden lutning rekonstruktion (RCT).
