È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Capitoli
- 00:05Titolo
- 01:31Virus Production
- 03:53Viral Transduction
- 05:47Reprogramming
- 07:24Isolation of Human iPS Cell Colonies
- 11:14Representative Results: Examining Transduction Efficiency and Characterizing Reprogrammed Cells
- 12:58Conclusion
Vi presenterer en protokoll for effektiv omprogrammering av humane somatiske celler inn i menneskeskapt påvirkning pluripotent stamceller (hiPSC) bruker retrovirale vektorer som koder Oct3 / 4, Sox2, Klf4 og c-myc (OSKM) og identifisering av korrekt omprogrammeres hiPSC av levende farging med Tra- 1-81 antistoff.
Tags
SelectingIsolatingColoniesHuman Induced Pluripotent Stem CellsReprogrammingAdult FibroblastsRetroviral VectorsOct3/4Sox2Klf4C-mycSodium ButyrateEfficient Transduction ProtocolVirus-containing MediaLive ImmunostainingTra-1-81Pluripotent CellsManually PassagedMatrigel PlatesFeeder-free ConditionsHES-like MorphologyExpansionCell LinesPluripotency MarkersTRA-1-60SSEA-4Oct3/4Sox2Nanog
