Hamsterlar ve Dorsal Skin Kutanöz Leishmaniasis: Antileishmanial Uyuşturucu Tarama için Faydalı Model

Optimize etmek için Kutanöz Le Moases için hamster modeli. Burada, pro magos uç dorsal derisinin intradermal inokülasyonunu kullanan bir yaklaşımı tarif ediyoruz. Bu yaklaşım, tipik lezyonların aşılama takibinde ve karakterizasyonunda, tedavilerin farklı yollarla uygulanmasında, paraklinik örneklerin elde edilmesinde, farklı umut verici bileşiklerin verilerinin elde edilmesinde, modelin yaşam kalitesinde önemli bir zarar anlamına gelmeden çok yönlülüğünü ve kolay yönetimini kanıtlamıştır.

Hareket, yiyecek ve su arayışı, oyun ve dikkatli hareketlerle sosyal aktivite ile ilgili olarak, emin ve sabit, hayvan, hamsterın sahip olduğu büyük miktarda deriden yararlanarak, parmakları kullanarak boynun tabanı tarafından tutulmalıdır. Elin avuç içi, hayvana kendini rahat hissettiği destekleyici bir yüzey sağlamak için kullanılır. Hayvan rahatlamış hissettiğinde, boynun ve keselerin derisi işaret parmağı ve başparmak ile gerilebilir ve parmakların geri kalanıyla torbanın derisini avuç içine sıkıca tutun, böylece hayvan tamamen hareketsiz hale gelir.

Dişide ayırt edici bir özellik, ilk haftadan itibaren iyi bir şekilde kanıtlanan Mi Mary serisinin görselleştirilmesidir. Diğer bir özellik ise kısa anogenital mesafedir. Erkeğin cinsiyetine gelince, testisleri içeren sincap kesesi gözlemlenebilir.

Buna ek olarak ve bunun bir sonucu olarak, anüs ile dört deri arasında daha büyük bir mesafe vardır. Hayvan, boynun tabanını sıkıca tutarak kavranır ve daha önce birkaç saniye sonra kalibre edilmiş bir tartı üzerinde şartlandırılmış bir tuzak veya kutuya yerleştirilir. Hayvan bu alanda rahat olduğunda, ağırlık okuması yapılır ve hemen uygun formatta kaydedilir.

Hamsterlerin tanımlanması için en yaygın yöntemler, cildin bir bölgesinin piri asit ile boyanması ve lekelenme için kulak delmedir. Piri asit ile prosedür aşağıdaki gibidir, hayvanı daha önce belirtildiği gibi kavrayın ve piri asidine batırılmış bir çubukla, genellikle ön veya arka uzuvları sola veya sağa işaretlemek için bölgeye nüfuz edin. Bu tanımlama yöntemi için hayvanın sedasyon veya anestezi altında olması önerilir.

Kesinlikle gerekli olmasa da, etiketlenecek u seçilir ve alkol ile dezenfekte edilir. Bundan sonra, kan damarlarının bulunduğu bölgeden kaçınarak delinecek alan seçilir. Daha sonra yıl, kemirgenler için bir kulak zımbası kullanılarak delinir, prosedür hızlı bir şekilde yapılmalıdır, ancak sağlam ve güvenli bir şekilde yapılmalıdır.

Bir kafeste iki ila üç hayvan olması gerektiği göz önüne alındığında. Yılda en fazla iki delik açılabilir. Anestezikin hayvana uygulanabilmesi için hamsterın hayvanla birlikte hareket etmesini engelleyecek şekilde başta belirtildiği gibi tutulması gerekir.

Sırtüstü pozisyonda ilacın uygulanacağı karın bölgesi %70 alkol kullanılarak dezenfekte edilir ve temiz bir pamukla kurutulur. İntraperitoneal yol, hayvan hafifçe başa doğru eğik olarak kullanılır, böylece viseral yer değiştirme meydana gelir. İğne tamamen omurgaya biraz paralel olarak sokulur.

Hiçbir organın delinmediğini doğrulamak için bir başlangıç aspirasyonu yapılır ve daha sonra ilaç, hayvanla aşılanacak deri bölgesini tıraş etmek için uygulanır. Geliştirilmiş konum, kuyruğun tabanından iki santimetre uzakta bir nokta işaretlenir. Makas kullanılarak, tüm saçlar çıkarılır, biyolojik bir güvenlik kabininde yaralanmaları önlemek için yaklaşık iki santimetre karelik bir alanı dikkatlice temizler ve hamster bir mililitrelik bir şırıngada, 100 mikrolitre bilinen logaritmik fazda anestezi altına alınır.

Leishmania pro maus servis edilir. Kazaları önlemek için önlem olarak iğne şırıngaya sabitlenmelidir. Hayvanın traş edilmiş bölgesini tek yönde temizlemek için steril tuzlu su çözeltisi ile pamuk kullanılır.

Daha sonra iğne eğimi yukarı doğru olacak şekilde hamsterın derisine nüfuz edilir ve iğnenin alt dermise yavaş ve kademeli bir şekilde girdiğinden emin olunur. İnokulum, iğneyi çıkarmak için bir subdermal pape oluşturmak üzere enjekte edilir, hafifçe döndürülür ve çekilir. Kullanılan tüm malzemeler atılır.

Leishmania tarafından üretilen cilt lezyonlarını izlemek için biyogüvenlik standartlarını takiben, bir lezyonun doğru bir ölçümü için süreci kolaylaştırmak için hayvanın bir tuzakta ilk immobilizasyonu önerilir. Aşılanan cilt bölgesinin palpasyonu, dijital bir kalibre yardımıyla sertleşmeyi ve oluşan ülseri tanımlamak için yapılır, ülserin genişliği kapatılır ve milimetre cinsinden ölçüm, klinik izleme için tasarlanmış bir formatta kaydedilir. Benzer şekilde, ülserin uzunluğu ölçülür ve bu da subdermal inokülasyondan sonra kaydedilmesi gerekir.

Sunulanlarla karşılaştırılabilir tipik lezyonlar elde etmek için dört ila beş hafta arasında bekleme süresi vardır. İnsanlarda. Hayvan, lezyonun olduğu sırtı açığa çıkarmanızı sağlayan özel bir kanalda hareketsiz hale getirilir.

Bir göz damlalığı kullanılarak, bileşik yaralanma üzerine eklenir ve hayvanı kafesine geri döndürmeden önce sıvı kurumaya bırakılır. Hayvan yukarıda gösterildiği gibi güvenli bir şekilde bağlandığında, alanı bir yönde alkol ve pamukla dezenfekte etmek için en yetenekli el kullanılır. Daha sonra aynı el, maksimum 200 mikrolitre hacminde kullanılacak ilacı içeren şırıngayı manipüle etmek için kullanılır.

İlaç, arka kısımdaki yarı hassasiyet veya yarı berness kaslarının yarı tendusu yoluyla enjekte edilir. İlacın birkaç gün boyunca uygulanması gerekiyorsa, daha az yetenekli bir el ile hayvana rahatsızlık ve zarar vermemek için uzuvlarda bir değişiklik meydana gelmelidir, hayvan daha önce belirtildiği gibi bağlanır. Diğer el, mide probunu manipüle etmek için kullanılır.

200 mikrolitreden daha büyük olmayan bir miktarı rahatça sağlamak için bir mililitrelik şırıngaya bağlanan 14 garaj. Hamster, tedavi edilecek alanı açığa çıkaran bir immobilize edici cihaz ile güvenli bir şekilde sabitlenir, bu da steril pamuk ve salin solüsyonu ile bir mililitrelik şırınga ile tek yönde tek bir tarama ile temizlenir, eğim aşağı ve 100 mikrolitreden büyük olmayan bir hacim, gerçekleştirilen lezyonların bir tepe noktası ile tek bir subdermal yaklaşım ve yavaş yavaş ilaç biriktirilir, kurban edilmeden önce lezyonun tüm alanını kaplar. Ötenazi işlemi için hayvanlar daha önce anlatıldığı gibi uyuşturulur.

Hamster, bir silindire veya bir karbondioksit ağına bağlı sızdırmaz bir akrilik odaya alınır. Valf, bir diseksiyon yüzeyine sabitlenmiş kurban edilen hamsterleri örneklemek için birkaç dakika boyunca yavaşça açılır. Deri ve iç organların izleri için cam ışıklara ihtiyaç vardır.

Histopatoloji örnekleri için% 10 forminli 15 mililitrelik şahin tüpleri ve malzeme diseksiyon, makas, cımbız, neşter, sap ve bıçakları içerir. Son olarak deri lezyonu veya skar, karaciğer, dalak, böbrek ve popal lenf nodlarından alınan örneklerde leishmania varlığı direkt olarak genesa ile boyanmış smearlerin incelenmesi ve bu dokuların histopatolojik incelemesi ile belirlenir. Bir biyopsi örneği% 10 formalin içinde sabitlenir ve parafine gömülür.

Fikse edilen dokuların beş mikronluk kesitleri hemat, toin eoin ile boyandı ve 1000 yağ daldırma kullanılarak optik mikroskop altında incelendi. Mikro mimariyi, hücresel sızıntının özelliklerini ve parazitlerin varlığını veya yokluğunu incelemek. Fotoğraf mikrografları çekilir ve dijital görüntüler yakalanır.

Tüm malzemeler, biyolojik atık bertarafı için biyogüvenlik düzenlemelerine uygun olarak atılmalıdır. Altın hamster Mi'nin hem eski hem de yeni dünya leishmania türlerinin neden olduğu kutanöz le esis'i incelemek için özellikle yararlı olduğu kanıtlanmıştır. Pro magos aşılaması, aşılamadan bir ila iki ay sonra kutanöz lezyonlara neden olabilir.

Hamster, deneysel enfeksiyondan sonra öngörülebilir bir hastalık evriminin yerini alır: insanlarda gözlenenlere benzer lezyonların gelişimi ile karakterize edilir Hamster modelinde kutanöz le ezisin kronik doğası nedeniyle, terapötik müdahalelerin uzun süreler boyunca izlenmesine izin verilir. Geleneksel olarak, hamsterlar deneysel olarak burun veya ayak yastığına aşılanır, ancak bu bölgelerde ve notlar her zaman oluşmaz. Ayrıca, lezyon boyutunun ölçülmesi zordur ve hamsterlar yemek yemek, nefes almak ve hareket etmek için zorluklar gösterir.

Özetle, bu yaklaşım, hamsterlerin dorsal derisinde indüklenen kutanöz le meeses'in klinik patolojik özelliklerinin, insan hastalığına oldukça benzer olduğunu, ancak yaygın olarak kullanılan deniz modelinden çarpıcı bir şekilde farklı olduğunu göstermektedir. Bu nedenle, hamsterlerin dorsal derisindeki deneysel enfeksiyon, bir H manuel ilaçları için aday olan bileşiklerin potansiyelini doğrulamak için yararlı bir modeli temsil eder.