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TransFLP - un metodo per modificare geneticamente<em> Vibrio cholerae</em> Sulla base di trasformazione naturale e FLP-ricombinazione
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Capitoli
- 00:05Titolo
- 01:16Preparation of Chitin Flakes
- 01:39Oligonucleotide Design and Polymerase Chain Reaction
- 03:45Chitin-induced Natural Transformation
- 04:59Removal of Selective Cassette(s) by FLP-recombination
- 05:46Plasmid Curing
- 06:21Results: Representative TransFLP Modifications of V. cholerae
- 11:34Conclusion
Un metodo rapido per modificare il genoma di<em> V. cholerae</em> È descritto. Queste modifiche includono la cancellazione dei singoli geni, i cluster di geni e le isole genomiche, nonché l'integrazione di brevi sequenze (ad esempio, elementi promotori o per affinità tag sequenze). Il metodo si basa sulla trasformazione naturale e FLP-ricombinazione.
Tags
TransFLPGenetically ModifyVibrio CholeraeNatural TransformationFLP-recombinationBacterial ChromosomesReplicative PlasmidsHomology-mediated RecombinationInsertional MutantsPlasmid ExcisionGram-negative BacteriaLevan Sucrase EnzymeSacB GenePre-insertion GenotypeModified GeneTime-consumingCloningHorizontal TransferArtificial TransformationPositive SelectionRapid ManipulationChitin-mediated InductionNatural Competence
