È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Capitoli
- 00:05Titolo
- 03:31DNA Template Preparation, In vitro Transcription and Translation
- 05:34Isolation of Nascent Polypeptides and Analysis by Tris-tricine SDS PAGE
- 07:17Representative RNC Results
- 07:57Conclusion
Vi beskriver här en teknik som nu används rutinmässigt för att isolera stabilt bunden ribosom framväxande kedjan komplex (RNC). Denna teknik drar fördel av upptäckten att en 17 aminosyror lång SecM "gripande sekvens" kan stoppa översättning töjning i en prokaryot (<em> E. coli</em>)-System, när de sätts in (eller fuserad till C-terminalen) av praktiskt taget vilket protein som helst.
Tags
SecM Arrest SequenceRibosome Bound PolypeptidesCo-translational FoldingIsolation TechniqueRNCs (ribosome-nascent Chain Complexes)Protein Folding PathwayConformational AnalysisSecM ProteinSecretion MonitorSecA ATPaseStalling SequencePeptidyl-glycyl-tRNAC-terminal RegionPolypeptide Chain ElongationIn Vivo Studies
