Rivista
/
Biologia
/
En protokoll for identifikasjon av protein-protein interaksjoner Basert på<sup> 15</sup> N Metabolsk Merking, Immunoutfellingsanalyse, Quantitative massespektrometri og Affinity Modulation
JoVE Journal
Biologia
This content is Free Access.
JoVE Journal Biologia
A Protocol for the Identification of Protein-protein Interactions Based on 15N Metabolic Labeling, Immunoprecipitation, Quantitative Mass Spectrometry and Affinity Modulation

En protokoll for identifikasjon av protein-protein interaksjoner Basert på<sup> 15</sup> N Metabolsk Merking, Immunoutfellingsanalyse, Quantitative massespektrometri og Affinity Modulation

DOI:
10.3791/4083-v

•

14:44 min

•

September 24, 2012

•

, , , , ,
1Max Planck Institute of Molecular Plant Physiology, 2University of Kaiserslautern

Capitoli

  • 00:05Titolo
  • 02:30Cell Lysis, Crosslinking and Sample Preparation
  • 05:22Immunoprecipitation
  • 07:06Sample Preparation for nano-LC-MS/MS
  • 10:50Results: HSP70B with its Nucleotide Exchange Factor CGE1
  • 14:07Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Traduzione automatica

Vi presenterer en variant av den QUICK (kvantitativt Immunoutfelling Kombinert med Knockdown) tilnærming som ble introdusert tidligere å skille mellom sanne og falske protein-protein interaksjoner. Vår tilnærming er basert på<sup> 15N</sup> Metabolsk merking, modulering av affiniteter av protein-protein interaksjoner ved tilstedeværelse / fravær av ATP, immunoutfelling og kvantitativ massespektrometri.

Tags

Protein-protein Interactions15N Metabolic LabelingImmunoprecipitationQuantitative Mass SpectrometryAffinity ModulationCo-immunoprecipitationTargeted ApproachMass Spectrometry (LC-MS/MS)False Positive DiscoveriesRNAiQUICK (QUantitative Immunoprecipitation Combined With Knockdown)

Article

Embed

AGGIUNGI ALLA PLAYLIST

Usage Statistics

Video correlati

check_url/it/4083?article_type=v

MALDI Sample Preparation: the Ultra Thin Layer Method
check_url/it/4083?article_type=v

A Quantitative Assessment of The Yeast Lipidome using Electrospray Ionization Mass Spectrometry
check_url/it/4083?article_type=v

In-vivo Detection of Protein-protein Interactions on Micro-patterned Surfaces
check_url/it/4083?article_type=v

Identifisering av protein komplekser i<em> Escherichia coli</em> Med sekvensiell Peptide affinitetsrensing i kombinasjon med tandem massespektrometri
check_url/it/4083?article_type=v

En ny tilnærming til den komparative analysen av Multiprotein Komplekser Basert på<sup> 15</sup> N Metabolsk Merking og kvantitativ massespektrometri
check_url/it/4083?article_type=v

Gransker Protein-protein interaksjoner i levende celler ved hjelp Bioluminesens Resonance Energy Transfer
check_url/it/4083?article_type=v

Chromatin Immunutfelling analyse for identifikasjon av Arabidopsis Protein-DNA interaksjoner<em> I Vivo</em
check_url/it/4083?article_type=v

Identifisering av myod interactome Bruke Tandem Affinity Rensing Koblet til massespektrometri
check_url/it/4083?article_type=v

Studiet av Protein-protein interaksjoner i Autophagy forskning
check_url/it/4083?article_type=v

Kvantifisering av områdespesifikke Protein lysin Acetylation og Succinylation støkiometri ved hjelp av Data-uavhengig oppkjøpet massespektrometri

Read Article