È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Capitoli
- 00:05Titolo
- 02:01Construction of Lentiviral Luciferase Reporters
- 02:28Production of Lentiviral Particles: Seed Cells (Day 1)
- 03:05Transient Transfection: CaPO4/DNA Precipitation (Day 2)
- 04:23Harvest Viral Particles (Days 3-4)
- 05:02Infection of 3T3 Cells (Day 3 Onward)
- 06:12Synchronization and Change to Recording Medium
- 07:02Bioluminescence Recording of Reporter Cells
- 07:26Data Analysis and Presentation
- 08:12Results: Phase-specific Circadian Reporters
- 09:47Conclusion
Circadian घड़ियों व्यक्ति की कोशिकाओं के भीतर कार्य, यानी, वे सेल स्वायत्त हैं. यहाँ, हम सेल स्वायत्त घड़ी गैर इनवेसिव, luciferase आधारित bioluminescence वास्तविक समय प्रौद्योगिकी का उपयोग कर मॉडल को पैदा करने के लिए तरीके का वर्णन करता है. रिपोर्टर कोशिकाओं विनयशील, circadian जीव विज्ञान के अध्ययन के लिए कार्यात्मक मॉडल प्रणाली प्रदान करते हैं.
Tags
Cell-autonomous Circadian Clock RhythmsGene ExpressionLuciferase Bioluminescence ReportersMammalian Circadian ClocksSleep-wake CyclesLiver MetabolismEndogenous Circadian ClocksSuprachiasmatic Nucleus (SCN)Peripheral ClocksOscillatorsNegative Feedback MechanismCell-based In Vitro AssaysLocomotor ActivitySCN Explants Ex VivoCell-based ModelsClock FunctionTemporal ResolutionReal-time Bioluminescence RecordingFirefly Luciferase Reporter
