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Selektive Aufnahme von 5-Hydroxymethylcytosin aus genomischer DNA
JoVE Journal
Biologia
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JoVE Journal Biologia
Selective Capture of 5-hydroxymethylcytosine from Genomic DNA
DOI:

06:26 min

October 05, 2012

, , ,

Capitoli

  • 00:05Titolo
  • 01:20Genomic DNA Fragmentation
  • 02:02Glucosyl Transfer: B-GT Reaction
  • 02:49Biotinylation Reaction: Click Chemistry
  • 03:30Capture of 5-hmC-containing DNA
  • 04:51Results: Selective Capture of 5-hmC from Genomic DNA
  • 06:01Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Beschrieben wird ein zweistufiges Verfahren unter Verwendung Kennzeichnung β-Glucosyltransferase (β-GT), um ein Azid-Glukose zu 5-HMC übertragen, gefolgt von Klickchemie einen Linker Biotin für die einfache und dichteunabhängigen Anreicherung zu übertragen. Dieses effiziente und spezifische Kennzeichnung Methode ermöglicht die Anreicherung von 5-HMC mit extrem niedrigen Hintergrund und hohem Durchsatz epigenomischen Mapping über Next-Generation-Sequenzierung.

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