È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Capitoli
- 00:05Titolo
- 01:18Preparation of Cells and Treatment with Translation Inhibitors
- 02:29Digitonin Extraction and Cell Fixation
- 04:47Fluorescent In situ Hybridization
- 06:21Washing and Mounting the Stained Samples
- 08:08Placental Alkaline Phosphatase and Cytochrome P450-8B1 mRNA ER-association
- 09:50Conclusion
Her beskriver vi en metode til at synliggøre endoplasmatiske reticulum-associerede mRNA'er i mammale vævskulturceller. Denne teknik involverer selektiv permeabilisering af plasmamembranen med digitonin til fjernelse af cytoplasmatisk indhold efterfulgt af fluorescerende<em> In situ</em> Hybridisering til påvisning af enten bulk-poly (A) mRNA eller specifikke transkripter.
