È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Capitoli
- 00:05Titolo
- 01:46Construction of Strains Containing FFL-GFP Plasmid
- 02:23Preparations Prior to FFL-GFP Induction and Enzymatic Recovery Assay
- 03:48Induction of FFL-GFP
- 06:22Enzymatic FFL-GFP Recovery Assay
- 07:35Fluorescence Microscopy
- 08:55Single Cell Microscopy
- 10:47Results: Hsp104 is Required for Efficient Refolding of Heat-denatured FFL-GFP
- 13:36Conclusion
Dit artikel beschrijft het gebruik van een vuurvlieg luciferase-GFP-fusie-eiwit te onderzoeken<em> In vivo</em> Eiwitvouwing in<em> Saccharomyces cerevisiae</em>. Met behulp van dit reagens, hervouwing van een model warmte-gedenatureerde proteïne kan gelijktijdig monitoren van fluorescentie microscopie en een enzymatische assay om de rol van proteostasis netwerkcomponenten eiwit kwaliteitscontrole sonde.
