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Coupled Assays for Monitoring Protein Refolding in Saccharomyces cerevisiae
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Gekoppelt Assays zur Überwachung Proteinrückfaltung in<em> Saccharomyces cerevisiae</em

DOI:
10.3791/50432-v

•

13:52 min

•

July 09, 2013

•

,
1Department of Microbiology and Molecular Genetics, Graduate School of Biomedical Sciences,University of Texas Medical School

Capitoli

  • 00:05Titolo
  • 01:46Construction of Strains Containing FFL-GFP Plasmid
  • 02:23Preparations Prior to FFL-GFP Induction and Enzymatic Recovery Assay
  • 03:48Induction of FFL-GFP
  • 06:22Enzymatic FFL-GFP Recovery Assay
  • 07:35Fluorescence Microscopy
  • 08:55Single Cell Microscopy
  • 10:47Results: Hsp104 is Required for Efficient Refolding of Heat-denatured FFL-GFP
  • 13:36Conclusion

Summary

Traduzione automatica

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Dieser Artikel beschreibt die Verwendung eines Leuchtkäfer-Luciferase-GFP-Fusionsprotein zu untersuchen,<em> In vivo</em> Proteinfaltung in<em> Saccharomyces cerevisiae</em>. Mit diesem Reagenz Rückfaltung eines Modells Hitze-denaturiertes Protein gleichzeitig durch Fluoreszenzmikroskopie und einem enzymatischen Assay, um die Rollen von Proteostase Netzkomponenten Proteinqualitätskontrolle Sonde überwacht werden.

Tags

Keywords: Protein RefoldingProteostasisProtein FoldingProtein AggregationFirefly LuciferaseGreen Fluorescent ProteinFFL-GFPHsp104Hsp40Hsp70Nucleotide Exchange FactorProtein ChaperonesProtein Quality ControlNeurodegenerative Disorders

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