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Capitoli
- 00:05Titolo
- 01:46Construction of Strains Containing FFL-GFP Plasmid
- 02:23Preparations Prior to FFL-GFP Induction and Enzymatic Recovery Assay
- 03:48Induction of FFL-GFP
- 06:22Enzymatic FFL-GFP Recovery Assay
- 07:35Fluorescence Microscopy
- 08:55Single Cell Microscopy
- 10:47Results: Hsp104 is Required for Efficient Refolding of Heat-denatured FFL-GFP
- 13:36Conclusion
Este artigo descreve o uso de uma luciferase de pirilampo-GFP proteína de fusão para investigar<em> In vivo</em> Dobramento de proteínas em<em> Saccharomyces cerevisiae</em>. Usando estes reagentes, redobrando de um modelo de proteína desnaturada pelo calor pode ser monitorizada por microscopia de fluorescência em simultâneo e um ensaio enzimático para sondar as funções dos componentes da rede Proteostase no controlo de qualidade de proteínas.
