激光诱导的慢性高眼压表征视觉缺陷的小鼠模型

该程序的总体目标是使用小鼠大小的小梁网的激光光凝术诱导慢性高眼压症。麻醉小鼠后，目标眼的瞳孔放大，然后前房变平。第二步是通过在垂直于表面的小梁网的圆周周围发射激光束来诱发高眼压症。

接下来，使用眼压计跟踪鼠标中随时间变化的眼压。最后一步是进行汽车测试以显示视力的变化。最终，可以随着时间的推移监测高血压引起的视觉缺陷。

获得批准的 I-A-C-U-C 方案后，通过腹膜内注射氯胺酮和甲苯噻嗪麻醉 40 至 60 天龄的 C 57 黑六小鼠。接下来小心地将眼药膏添加到左对照眼中，然后用一滴或两滴 1% 硫酸阿托品溶液局部治疗散大右眼瞳孔。瞳孔完全散大后，将锋利的玻璃微量移液器插入眼睛的前腔，以排出前房中的液体。

这将使前房变平并增强激光感应。然后将鼠标放在裂隙灯下，将鼠标固定在塑料锥形支架中并固定在自制平台上。接下来，通过将波长设置为 514 纳米，将功率设置为 100，将毫瓦设置为脉冲长度为 50 毫秒，将光斑大小设置为 200 微米来准备 Argonne 激光源。

准备好激光后，用限制器握住鼠标，将鼠标的右眼暴露在裂隙灯后面的光源下，以便对准激光。然后使用氩激光将激光照射到角膜缘，在小梁网的圆周周围垂直提供 80 到 100 个激光点。见 57 只黑六只老鼠。

有一个有色虹膜，它可以作为任何潜在杂散能量的屏障。手术后，在眼表局部滴注 0.5% 莫西沙星以对激光治疗区域进行消毒，并滴注 0.5% 丙烷以缓解疼痛。将动物放在加热垫上恢复约一个小时，直到它完全清醒。

将醒来的鼠标放入试管中，然后将它们装入塑料锥形支架中。接下来，在平台上约束它。注意不要过度约束鼠标，因为这可能会导致人为增加眼压测量值。

等待 5 到 10 分钟，让鼠标适应支架位置。然后慢慢地将回弹计时器靠近控制眼，直到探头尖端距离角膜表面 2 到 3 毫米。始终首先测量未治疗的对照眼，以获得接下来测量的激光治疗眼的基线读数。

一旦回弹计时器就位，按下测量按钮，使探头尖端轻轻撞击角膜的中心表面。连续进行三组六次测量同一只眼睛的眼压。然后使用运动测试对每次眼科测试的视力和对比敏感度进行平均这些测量值。

这是通过首先将鼠标放在一个由四个计算机显示器包围的高架平台上并让它自由移动来实现的。设置验光仪的监视器，以便它们将水平漂移的正弦等级显示为视觉刺激，平均亮度为每平方米 39 个耳管。放坡的移动方向应在顺时针和逆时针之间连续交替。

测试期间。使用放置在鼠标上方的摄像机记录鼠标的移动。使用顺时针漂移分级来识别左眼的视觉功能，使用逆时针漂移分级来识别右眼。

每次测试大约需要 15 分钟，并在测试计数运动期间由两名观察员独立重复，这些运动与漂移等级一致，作为正运动。如果它们发生在开始后的 15 秒内，则在 15 秒后增加视觉刺激以找到最高的反应，从而引发视觉刺激作为动物的视力。接下来，检查每只动物在三个预选空间频率下的对比敏感度，将每只眼睛的对比度阈值定义为在前缀频率下引起视觉反应的最低对比度。

几乎每只接受激光治疗的眼睛的眼压都趋于升高。然而，只有不到 5% 的小鼠表现出严重损伤的身体迹象，例如眼球瘪、严重白内障、明显的色素沉着、脱离或出血。这里显示了眼压变化的一个例子。

激光治疗后一周。治疗眼的眼压几乎是未治疗眼的两倍，并且保持升高约 16 周。升高的压力恢复到接近正常水平。

在 20 周左右，治疗后的眼睛视力下降。遵循程序。这种情况持续了至少 6 个月，并且持续时间超过眼压升高的时间。

同样，观察到眼压升高的治疗眼的对比敏感度较低。