È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
1Greenebaum Cancer Center,University of Maryland School of Medicine, 2Program in Molecular Medicine,University of Maryland School of Medicine, 3Department of Biochemistry & Molecular Biology,University of Maryland School of Medicine, 4Department of Pharmacology & Experimental Therapeutics,University of Maryland School of Medicine, 5Department of Pathology and Biochemistry & Molecular Biology,University of Maryland School of Medicine
Capitoli
- 00:05Titolo
- 01:49Cell Culture and Nuclear Protein Isolation
- 02:46Preparation of 96-well Plates by Incubation with Nuclear Extracts
- 03:58Measurement of RUNX2 DNA Binding
- 05:36Results: Inhibition of RUNX2 DNA Binding
- 06:22Conclusion
Мы разработали количественный ДНК-связывающий, ИФА на основе анализа для измерения фактора транскрипции взаимодействия с ДНК. Высокая специфичность для белка Runx2 была достигнута с консенсусной олигонуклеотида ДНК-распознавания и специфического моноклонального антитела. Колориметрические обнаружения с реакции с субстратом антитела с ферментом в сочетании контролировали в реальном времени.
