È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Capitoli
- 00:05Titolo
- 02:23Site-specific Genetic Incorporation of Unnatural Amino Acids into GPCRs
- 03:15Mapping a Ligand Binding Site Using Targeted Photocrosslinking
- 07:12Targeted Epitope Tagging and Cell Surface Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA)
- 10:23Bioorthogonal Fluorescent Labeling of a GPCR
- 12:10Results: Versatile Applications of Site-specific azF Incorporation into GPCRs
אנחנו גנטיים מקודדים את חומצת אמינו לא טבעית, p-azido-L-פנילאלנין בעמדות ממוקדות שונות בGPCRs ולהראות את הרבגוניות של קבוצת azido ביישומים שונים. אלה כוללים טכנולוגיה ממוקדת photocrosslinking לזהות שאריות בכיס מחייב ליגנד של GPCR, ושינוי bioorthogonal אתר ספציפי של GPCRs עם תג פפטיד epitope או בדיקה ניאון.
