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Chimica
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Matrix-assistierte Laser Desorptions / Ionisations-Flugzeit (MALDI-TOF)-Massenspektrometrie-Analyse von intakten Proteinen mit mehr als 100 kDa
JoVE Journal
Chimica
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JoVE Journal Chimica
Matrix-assisted Laser Desorption/Ionization Time of Flight (MALDI-TOF) Mass Spectrometric Analysis of Intact Proteins Larger than 100 kDa
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Matrix-assistierte Laser Desorptions / Ionisations-Flugzeit (MALDI-TOF)-Massenspektrometrie-Analyse von intakten Proteinen mit mehr als 100 kDa

DOI:
10.3791/50635-v

•

07:49 min

•

September 09, 2013

•

,
1Institute of Structural Biology “J.P. Ebel”, UMR5075, Commissariat à L’Energie Atomique et aux Energies Alternatives (CEA), Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS),Université J. Fourier

Capitoli

  • 00:05Titolo
  • 01:09Recrystallization of Matrices in order to Improve Their Purity (Optional)
  • 02:06Cleaning of MALDI Stainless Steel Target
  • 02:49&#945-CHCA Thin Layer Solution: Preparation and Deposition on the MALDI Target
  • 03:18Preparation of Matrix Solutions: &#945-CHCA, DHB, and CHCA_DHB Mixture
  • 04:04Sample Deposition on the MALDI Target and MALDI Spectra Acquisition
  • 05:17Results: MALDI-TOF Analysis of Proteins Larger than 100 kDa
  • 07:08Conclusion

Summary

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Genaue Massenmessung stellt einen wichtigen Schritt bei der Untersuchung von Proteinen. Matrix-unterstützte Laserdesorption / Ionisation (MALDI) Massenspektrometrie (MS) für eine solche Bestimmung verwendet werden, und deren wesentliche Vorteil ist die Toleranz zu Salzen, Detergenzien und Verunreinigungen. Hier veranschaulichen wir eine zugängliche Ansatz für die Analyse von Proteinen, die größer als 100 kDa durch MALDI-MS.

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Keywords: MALDI-TOFMass SpectrometryIntact ProteinsProtein AnalysisProtein CharacterizationLarge ProteinsProtein Mass DeterminationSample PreparationMatrixCalibrationLaser EnergyAcquisition Time

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