Large-scale Gene Knockdown in C. elegans Using dsRNA Feeding Libraries to Generate Robust Loss-of-function Phenotypes

Kathryn N. Maher; Mary Catanese; Daniel L. Chase

doi:10.3791/50693

/

Storskalig Gene Knockdown i C. elegans Med hjälp av dsRNA Feeding bibliotek för att generera Robust förlust-av-funktion Fenotyper

JoVE Journal
Biologia

È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.

JoVE Journal Biologia

Large-scale Gene Knockdown in C. elegans Using dsRNA Feeding Libraries to Generate Robust Loss-of-function Phenotypes

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Storskalig Gene Knockdown i C. elegans Med hjälp av dsRNA Feeding bibliotek för att generera Robust förlust-av-funktion Fenotyper

DOI:

10.3791/50693-v

•

18:38 min

•

September 25, 2013

•

Kathryn N. Maher, Mary Catanese, Daniel L. Chase

¹Molecular and Cellular Biology Program,University of Massachusetts, Amherst, ²Neuroscience and Behavior Program,University of Massachusetts, Amherst, ³Department of Biochemistry and Molecular Biology,University of Massachusetts, Amherst

Capitoli

00:05Titolo
02:54How to Determine Plasmid Loss
04:32Making Temporary Copies of the Library Omniplates
06:35Preparation of Bacteria for Feeding Worms
09:28Determining the Concentration of L1 Arrested C. elegans Larvae
10:53dsRNA Feeding Screen
12:37Results: Effects of egl-30, dpy-17, pat-10, and unc-4 Knockdown
17:50Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Medan dsRNA utfodring i C. elegans är ett kraftfullt verktyg för att bedöma geners funktion, löpande protokoll för storskaliga utfodring skärmar resultera i variabla knockdown effektivitet. Vi beskriver ett förbättrat protokoll för att utföra storskaliga RNAi utfodring skärmar som resulterar i mycket effektiv och reproducerbar knockdown av genuttryck.

Article

Embed

AGGIUNGI ALLA PLAYLIST

Usage Statistics

Video correlati

Storskaliga skärmar Metagenomic bibliotek

Generering av Stabil Transgena C. elegans Använda mikroinjektion

Hjälp av ett automatiserat celltalsräknare att förenkla Studier Gene Expression: siRNA Knockdown av IL-4 beroende genuttryck i Namalwa Cells

Large Scale Zebrafish-Based In vivo Småmolekylära skärm

RNAi screening identifiera Postembryonic fenotyper i C. elegans</em

Använda SecM Arrest sekvens som ett verktyg för Isolera ribosom Bundna Polypeptider

Använda RNA-medierad strategi Interference Matning att screena för gener involverade i kroppsstorlek förordningen i rundmasken C. elegans C. Elegans Använda "Freeze-Cracking"

Metoder för att bedöma Subcellulära Fack för Muscle in C. elegans</em