January 10th, 2014
Un allungamento della durata del pasto rappresenta il comportamento nocicettivo orofacciale nei roditori simile al comportamento di guardia degli esseri umani con dolore orofacciale. Mangiare è un comportamento che non richiede alcun allenamento o manipolazione animale, richiede partecipazione corticale e non è in competizione con altri comportamenti indotti sperimentalmente, distinguendo questo saggio da misurazioni alternative riflesse o operanti.
L'obiettivo generale di questa procedura è determinare che le misurazioni della durata dei pasti siano un correlato quantitativo al dolore alla mascella e ai denti. Ciò si ottiene posizionando prima i ratti in gabbie di alimentazione per ottenere una misurazione di base della durata del pasto. Una volta ottenute le misurazioni di base, un agente antidolorifico viene iniettato nell'articolazione tempo-mandibolare o nell'articolazione del ginocchio come controllo.
Dopo l'iniezione, l'animale viene riportato nella gabbia di alimentazione e si osserva il comportamento alimentare fino a quando non ritorna ai livelli basali. In definitiva, i dati vengono raccolti e analizzati per dimostrare che gli animali con dolore alla mascella hanno una durata dei pasti più lunga. Ci sono molti vantaggi nell'utilizzare la durata dei pasti e i modelli dei pasti per analizzare il dolore nei modelli di roditori, ma riteniamo che due dei principali vantaggi di questo modello rispetto ad altri tipi di modelli siano che non dobbiamo trattenere gli animali, né l'animale deve essere addestrato.
Alcuni anni fa, abbiamo notato che non esisteva un buon metodo per misurare il dolore facciale orale in un modello animale. Questo ci ha portato a esplorare la possibilità che l'analisi dei modelli di pasto potesse essere utilizzata per misurare il dolore facciale orale. Ciò ha portato allo sviluppo del modello che abbiamo utilizzato oggi per misurare il dolore facciale orale.
Gli studi sulla durata dei pasti vengono eseguiti in camere insonorizzate dotate di alimentatori di pellet attivati da computer, aggiungendo cibo per roditori alla tramoggia del cibo composta da pellet da 45 milligrammi. Questi pellet vengono erogati nella mangiatoia sottostante che è dotata di un raggio fotografico. C'è un vetrino di copertura posizionato sopra l'apertura del raggio fotografico per evitare che le particelle ne blocchino il percorso.
Una volta che un ratto rimuove il pellet dalla mangiatoia, il raggio fotografico viene ripristinato e al computer viene segnalato di rilasciare un altro pellet. In questo modo, un pellet è sempre disponibile senza alcuno sforzo aggiuntivo da parte dell'animale. Dopo aver riempito la bottiglia d'acqua, posizionare la carta assorbente nella vaschetta dei rifiuti sottostante.
Per iniziare, caricare il software di monitoraggio degli animali e selezionare la configurazione dal menu a discesa per impostare le unità di alimentazione. Deselezionare la casella di ingresso del pellet erogato per registrare quando il pellet viene rimosso dal trogolo anziché quando viene erogato. Quindi, seleziona la casella di denominazione automatica dei file per assegnare automaticamente un nome ai file.
Dopo aver scelto l'opzione esperimento dal menu a discesa di modifica, inserisci il nome del file nella nuova finestra per assicurarti che i dati vengano raccolti correttamente. Inserisci un valore che superi il tempo totale dell'esperimento nella casella Giorni di durata dell'esperimento. Quindi, imposta il numero di ore in un giorno su 24 per il periodo e i criteri dei pasti.
Immettere un valore di 10 minuti. Inserire 45 nella casella intitolata milligrammi di dimensione del pellet. Nella sezione della fase della finestra dell'esperimento, inserisci il termine giorno nel campo del nome e nel campo del numero di ore.
Digita 24 come esempio. Sotto l'intestazione della fase diurna, immettere la parola luce nel campo del nome e immettere 60 nel campo della percentuale. Ripetere questa procedura inserendo il colore scuro nel campo del nome con un valore percentuale di 40.
Quindi, seleziona le caselle imposta tutto come questo pulsante. Salva queste informazioni e poi premi ok. Quando viene visualizzata la schermata delle caselle di avvio, seleziona gli alimentatori da attivare e premi ok.
Appariranno quindi le finestre di runtime del monitor degli animali con i dati del modello di pasto. Dopo aver osservato il comportamento alimentare di base, rimuovere l'animale dalla mangiatoia per indurre il dolore da artrite dell'articolazione temporo-mandibolare. Una volta anestetizzato, localizzare l'articolazione temporo-mandibolare e iniettare l'adiuvante fres completo nello spazio perticolare.
Ripetere questa procedura sull'altro lato. Ai ratti di controllo vengono iniettati 50 microlitri di soluzione fisiologica allo 0,9%. A un altro gruppo di animali viene iniettato CFA nell'articolazione del ginocchio.
Dopo l'iniezione, riportare gli animali nell'unità di alimentazione non appena si riprendono dall'anestesia. Durante il test della durata del pasto, monitorare il comportamento alimentare dei ratti artritici fino a quando la durata del pasto non ritorna ai livelli basali. Questo può variare da uno a 19 giorni, a seconda del dosaggio di CFA.
Le impostazioni del software configurate in precedenza terranno traccia del numero di pellet erogati in un determinato periodo di tempo durante il saggio. Sciacquare e rinfrescare le bottiglie d'acqua ogni giorno e aggiungere il cibo alla tramoggia dell'alimentatore. Quando necessario, sostituire quotidianamente la carta assorbente per ottenere i migliori risultati.
Soffiare la polvere dalla mangiatoia e dalle parti mobili dell'alimentatore utilizzando aria ad alta pressione e pulire quotidianamente il vetrino coprioggetti. Pulire il percorso del raggio fotografico se si osserva un blocco. Al termine dello studio, rimuovere e lavare tutti i componenti della gabbia.
I file vengono generati ogni giorno e si aprono automaticamente per recuperare i dati del modello dei pasti come l'assunzione di cibo, il numero dei pasti o la durata dei pasti. In alternativa, i modelli dei pasti possono essere calcolati utilizzando un software proprietario a seconda delle esigenze del ricercatore in questo esperimento. I ratti con dolore da artrite dell'articolazione temporo-mandibolare indotta da CFA hanno mostrato un aumento significativo della durata del pasto per 19 giorni rispetto agli animali iniettati con soluzione salina o a quelli che hanno ricevuto iniezioni di CFA nel ginocchio.
Questo metodo può essere applicato ad altre forme di dolore orale come mostrato qui. La durata del pasto è stata aumentata anche nei ratti che hanno avvertito dolore dopo l'esposizione alla polpa dentale. Quando si utilizza questa procedura, è necessario risolvere due elementi che è necessario risolvere probabilmente ogni giorno.
Quando si utilizza uno spray per ratti di circa 300 grammi, dovrebbero mangiare tra i 300 e i 600 pellet al giorno. Se mangiano meno pellet di 300, ad esempio, c'è probabilmente un problema con il sensore nella parte superiore dell'unità di alimentazione che deve solo essere pulito. Se stanno mangiando più di 600 pellet, probabilmente è il sensore nella mangiatoia e dovrebbe essere pulito.
Quindi queste sono solo due cose che devi tenere a mente quando esegui questo test. Il modello di analisi del modello di pasto presenta diversi vantaggi rispetto ad altri modelli quando si studia il dolore facciale orale. Il modello coinvolge percorsi corticali e quindi non misura semplicemente i meccanismi riflessi.
Il modello può essere utilizzato 24 ore al giorno e non richiama comportamenti alternativi. Questo modello diventa quindi uno strumento molto potente nello studio del dolore facciale orale.
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Questo studio investiga la durata dei pasti come indicatore comportamentale del comportamento nocicettivo orofacciale nei roditori, parallelamente alle risposte al dolore umane. Il metodo permette l'osservazione del comportamento alimentare senza la necessità di trattenere o addestrare gli animali.