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Herstellung von primären Neuronen für die Visualisierung von Neuriten in einem tiefgefrorenen Zustand unter Verwendung von Kryo-Elektronentomographie
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1Department of Molecular Physiology and Biophysics,Baylor College of Medicine, 2Department of Neuroscience,Baylor College of Medicine, 3Department of Neuroscience,University of California at San Diego, 4National Center for Macromolecular Imaging, Verna and Marrs McLean Department of Biochemistry and Molecular Biology,Baylor College of Medicine
Capitoli
- 00:05Titolo
- 01:19Preparing Dishes with EM Grids
- 03:43Preparing and Plating Primary Neurons on EM Grids
- 04:45Vitrifying Neurons on EM Grids
- 08:05Results: Visualizing Neurites in a Frozen-hydrated State Using Cryo-Electron Tomography
- 09:32Conclusion
Neuronale Prozesse zur ultrastrukturellen Analyse zu erhalten, beschreiben wir ein Protokoll für die Beschichtung von primären Neuronen auf Elektronenmikroskopie Gitter gefolgt von einem Blitzgefrieren, wodurch Proben in einer Schicht von glasartigem Eis suspendiert. Diese Proben können mit einer Kryo-Elektronenmikroskop auf Strukturen im Nanometerbereich sichtbar zu prüfen.
